液相微萃取在中藥齊墩果酸和熊果酸分析及其與蛋白結(jié)合的應(yīng)用研究.pdf

1、同分異構(gòu)體的三萜酸化合物齊墩果酸（oleanolicacid,OA）和熊果酸（ursolicacid,UA）具有非常低的紫外吸收，且通常同時存在于同種植物中，二者的同時分離和測定不易。目的：本文利用分散液相微萃?。╠ispersiveliquid-liquidmicroextraction,DLLME）結(jié)合高效液相色譜法同時萃取和測定中草藥枇杷葉和白花蛇舌草中OA和UA的含量，為復(fù)雜樣品中藥有效成分的分離、純化和濃縮提供一個簡便、環(huán)境友

2、好的前處理方法。方法：考察了萃取劑種類與體積、分散劑體積、供相pH、離子強(qiáng)度、萃取時間、供相體積、離心轉(zhuǎn)速和時間等因素對DLLME的影響。結(jié)果：在優(yōu)化的條件下，OA和UA得到了良好的萃取效率，富集倍數(shù)分別達(dá)到1378和933，OA和UA的線性范圍分別為0.07％-30.4μg/mL，和0.08%-33.6μg/mL，相關(guān)系數(shù)均為0.9963；OA和UA的檢測限均為0.02μg/mL；平均回收率范圍分別在88.2%-116.2％和85.7

3、%-108.2％之間，RSD低于8.6％。結(jié)論：該方法能同時萃取和測定白花蛇舌草和枇杷葉樣品中的OA和UA，有機(jī)溶劑用量少，是一種簡便、有效、環(huán)境友好的中藥復(fù)雜成分分析前處理的方法
　　本文利用中空纖維溶劑棒微萃取（hollowfibersolventbarmicroextraction,HFSBME）結(jié)合高效液相色譜法(HPLC)用于中草藥中兩種同分異構(gòu)三萜酸化合物的濃縮和含量測定。目的：對HFSBME萃取機(jī)理進(jìn)行分析討論，將其

4、應(yīng)用于真正樣品中齊墩果酸(oleanolicacid,OA)和熊果酸(ursolicacid,UA)的濃縮和含量測定。方法：對HFSBME影響因素進(jìn)行了選擇和優(yōu)化；與幾種萃取模式的萃取結(jié)果進(jìn)行比較并討論其萃取機(jī)理；對HFSBME萃取后分析物的富集倍數(shù)和萃取效率及其關(guān)系進(jìn)行定義和推導(dǎo)。結(jié)果：在優(yōu)化的條件下，利用HFSBME結(jié)合HPLC對4種中藥材樣品中OA和UA進(jìn)行同時萃取、濃縮和含量測定。測得OA和UA富集倍數(shù)分別為141.8和47.3

5、；線性范圍分別為3.6-1820.0ng/mL和4.2-2080.0ng/mL；檢測限為1.3和1.5ng/mL；平均回收率范圍分別在93.2%-116.7％和83.3%-114.2％之間。結(jié)論：HFSBME結(jié)合HPLC可同時、快速的對兩種同分異構(gòu)三萜酸化合物進(jìn)行濃縮和含量測定，且具有操
　　本文將中空纖維溶劑棒微萃取（hollowfibersolventbarmicroextraction，HFSBME）結(jié)合高效液相色譜法（hi

6、ghperformanceliquidchromatography，HPLC）用于藥物蛋白結(jié)合的研究。目的與方法：HFSBME結(jié)合HPLC同時、快速地測定兩種同分異構(gòu)三萜酸齊墩果酸(oleanolicacid,OA)和熊果酸(ursolicacid,UA)與牛血清白蛋白（bovineserumalbumin,BSA）和人血清白蛋白（humanserumalbumin,HSA）的蛋白結(jié)合率，計算并獲得相應(yīng)的結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點數(shù)；嘗試了藥物

7、與結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT116的相互作用，用消炎痛進(jìn)行了陽性對照實驗，得出初步結(jié)論。結(jié)果：OA和UA與BSA的結(jié)合率分別為73.5%和90.9%，結(jié)合常數(shù)分別為53500和90900，結(jié)合位點數(shù)均為0.2；與HSA的結(jié)合率分別為81.1%和91.0%，結(jié)合常數(shù)分別為87400和121300，結(jié)合位點數(shù)分別為0.2和0.1。結(jié)論：HFSBME結(jié)合HPLC用于藥物蛋白結(jié)合的測定，方法簡單、可靠，為中草藥中活性成分的篩選和藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)的闡明提供