一碳單位代謝酶基因多態(tài)性、環(huán)境暴露與結(jié)直腸癌關(guān)系的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、研究背景與目的：結(jié)直腸癌是一種常見消化道惡性腫瘤之一。近年來，我國結(jié)直腸癌的發(fā)生率和死亡率均呈逐年上升趨勢。 結(jié)直腸癌的發(fā)生是一個多因素、多步驟的過程，主要受環(huán)境暴露因素的影響。主要包括高脂肪低纖維素飲食，煎炸熏烤食品，少食蔬菜及水果，吸煙飲酒、飲用不潔水、體力活動較少或靜坐時間過長，以及腸息肉和粘液血便等疾病史。此外，腫瘤遺傳易感性在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中也起著十分重要的作用，體內(nèi)參與癌變的基因序列的改變，賦予個體不同的遺傳背景。

2、 近十多年來，一碳單位代謝與惡性腫瘤的關(guān)系日益受到關(guān)注。 本研究應(yīng)用以隊列人群為基礎(chǔ)的病例對照研究，了解一碳單位代謝酶基因多態(tài)性在自然人群中的分布頻率及其在群體水平上與結(jié)直腸癌易感性的關(guān)系，并在此基礎(chǔ)上，分析一碳單位代謝酶基因—基因交互作用，以及基因多態(tài)性與相關(guān)環(huán)境暴露因素以及一碳單位代謝相關(guān)營養(yǎng)素之間的交互作用與結(jié)直腸癌易感性的關(guān)系。 材料與方法：以浙江嘉善縣10個鄉(xiāng)鎮(zhèn)參加過1989-1990結(jié)直腸癌普查的64

3、693人的隨訪隊列為研究人群。從中選取1990年5月至2005年5月該隊列發(fā)生的207例結(jié)直腸癌存活病例(結(jié)腸癌93例，直腸癌114例)組成病例組。按照該隊列人群的年齡、性別分布，采用分層抽樣方法抽取950人組成對照組，實際調(diào)查847人，其中調(diào)查問卷和血樣都齊備的有841人。采用單純隨機抽樣方法從這841人中抽取2倍于病例組樣本量的對照，即414人作為本研究數(shù)據(jù)分析的對照樣本。 通過流行學(xué)問卷調(diào)查獲得現(xiàn)場資料。調(diào)查內(nèi)容包括：一般

4、狀況，生活方式與習(xí)慣，飲食習(xí)慣與種類以及既往疾病史等。通過詢問各類食物的單次攝入量和攝入頻率獲得常見食物攝入量信息，并使用統(tǒng)一制作的食物模型輔助調(diào)查。 每位研究對象同時抽取5ml外周血。實驗室檢測采用改良鹽析法抽提外周血白細胞DNA；MTHFRC677T、A1298C、MTRA2756G、MTRRA66G和TS3'-UTR多態(tài)位點檢測采用聚合酶鏈-限制性片斷長度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法。TS5'-UTR多態(tài)位點檢測采用PC

5、R方法擴增目的片段后直接經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分析。 全部調(diào)查表格經(jīng)統(tǒng)一編碼后，用EPIDATA2000軟件雙遍輸入，校對無誤后進行統(tǒng)計分析。分類變量在病例組和對照組的分布特征采用x2檢驗；研究因素與結(jié)直腸癌OR值估計采用非條件Logistic回歸模型擬合，采用卡方趨勢檢驗判斷是否存在劑量—反映關(guān)系，基因—基因和基因—環(huán)境交互作用的P值用似然比檢驗計算。各種食物能量和營養(yǎng)素含量參考《中國食物成分表2002》和《中國食物成分表2004》

6、。全部統(tǒng)計分析均在SPSS13.0forWindows和MicrosoftExcel2003軟件中進行。 結(jié)果：1.相關(guān)環(huán)境暴露因素與結(jié)直腸癌一般情況中，結(jié)腸癌在年齡大于62歲以上的人群中多見，OR值分別為2.34(95％CI,1.17-4.68)和2.04(95％CI,1.00-4.17)。高中及以上文化程度者患結(jié)腸癌的風(fēng)險呈現(xiàn)有統(tǒng)計2學(xué)意義的升高，OR值為2.31(95％CI,1.05-5.08)，而農(nóng)民患結(jié)腸癌的風(fēng)險則顯著

7、下降，OR值為0.56(95％CI,0.34-0.90)。 疾病史方面，既往有腸息肉、結(jié)直腸炎和血吸蟲病史者結(jié)、直腸癌風(fēng)險均顯著增高，OR值分別為17.38(95％CI,3.34-90.42)和18.21(95％CI,3.82-86.71)，2.75(95％CI,1.02-7.43)和3.36(95％CI,1.38-8.16)，以及4.18(95％CI,2.37-7.36)和3.09(95％CI,1.91-4.99)。

8、吸煙飲酒方面，飲烈性酒者結(jié)腸癌風(fēng)險顯著升高，OR值為2.50(95％CI,1.20-5.23)。被動吸煙者結(jié)、直腸癌風(fēng)險均呈現(xiàn)有統(tǒng)計學(xué)意義的升高，OR值分別為2.14(95％CI,1.11-4.14)和1.92(95％CI,1.09-3.37)。 飲食方面，喜食硬食者患直腸癌的風(fēng)險顯著升高，OR值為2.29(95％CI,1.29-4.05)。常吃白菜類蔬菜可使直腸癌風(fēng)險顯著下降，OR值為0.98(95％CI,0.96-1.00)

9、，常吃桔、橘和橙可使結(jié)腸癌風(fēng)險顯著下降，OR值為0.91(95％CI,0.84-0.98)。 能量和一碳單位代謝相關(guān)營養(yǎng)素方面，中等能量攝入水平組個體患結(jié)腸癌風(fēng)險顯著升高，OR值為1.84(95％CI,1.03-3.31)，中、高能量攝入水平組個體患直腸癌的風(fēng)險均呈有統(tǒng)計學(xué)意義的升高，OR值分別為2.11(95％CI,1.20-3.70)和1.91(95％CI,1.10-3.31)。高VitB2攝入組個體罹患直腸癌的風(fēng)險顯著降低

10、，OR值為0.50(95％C1.0.25-0.97)。 2.一碳單位代謝酶基因多態(tài)與結(jié)直腸癌MTR2756G等位基因攜帶者患結(jié)腸癌、直腸癌的風(fēng)險顯著升高，OR值分別為2.01(95％CI,1.12-3.60)和1.86(95％CI,1.08-3.21)；MTRR66G等位基因攜帶者患直腸癌風(fēng)險顯著升高，OR值為1.93(95％CI,1.21-3.10)。 3.基因—基因交互作用與結(jié)直腸癌TS5'-UTR和3'-UTR多態(tài)

11、之間P交互＜0.01(結(jié)腸癌)，3R/3R基因型合并ins6等位基因攜帶者和del6/del6基因型合并3R等位基因攜帶者結(jié)腸癌風(fēng)險顯著下降，OR值分別為0.46(95％CI,0.25-0.84)和0.23(95％CI,0.08-0.69)。 4.基因—環(huán)境交互作用與結(jié)直腸癌 4.1與吸煙MTHFRC677T與吸煙史之間P交互為0.03(結(jié)腸癌)，無吸煙史并677T等位基因攜帶者結(jié)腸癌的風(fēng)險下降，OR值為0.23(95％

12、CI,0.05-1.13)。MTHFRC677T與吸煙年限之間P交互為0.03(結(jié)腸癌)和0.03(直腸癌)，677CC基因型并吸煙年限＜32年者患直腸癌風(fēng)險顯著下降，OR值為0.16(95％CI,0.04-0.60)，不吸煙并攜帶MTHFR677T等位基因者結(jié)腸癌風(fēng)險下降，OR值為0.24(95％CI,0.05-1.20)。 4.2與飲酒TS3'-UTR多態(tài)和飲酒史之間P交互為0.03(結(jié)腸癌)，無飲酒史并ins6等位基因攜帶

13、者結(jié)腸癌風(fēng)險顯著下降，OR值為0.46。TS5'-UTR多態(tài)與飲酒年限之間P交互為0.02(直腸癌)，飲酒年限≥30年并2R等位基因攜帶者直腸癌風(fēng)險顯著增高，OR值為2.81。TS3'-UTR多態(tài)與飲酒年限之間P交互分別為0.03(結(jié)腸癌)和0.04(直腸癌)，不飲酒并ins6等位基因攜帶者結(jié)腸癌風(fēng)險顯著下降，OR值為0.48。 4.3與VitB6攝入MTRA2756G與VitB6攝入之間P交互為0.05(結(jié)腸癌)，低VitB6

14、攝入組和中等攝入組中2756G等位基因攜帶者結(jié)腸癌的風(fēng)險升高，OR值為2.85和3.46。 4.4與VitB12攝入MTHFRC677T與VitB12攝入P交互為0.04(直腸癌)，高攝入組中677T等位基因攜帶者直腸癌風(fēng)險下降，OR值為0.49。MTRA2756G與VitB12攝入之間P交互為0.02(直腸癌)，低VitB12攝入并2756G等位基因攜帶者直腸癌顯著增高，OR值為4.26。 4.5與葉酸攝入MTHFRA

15、1298C與葉酸攝入量之間P交互分別為0.03(結(jié)腸癌)和0.02(直腸癌)，低葉酸攝入并1298C等位基因結(jié)腸癌風(fēng)險升高，OR值為2.12。 4.6與蛋氨酸攝入MTHFRC677T與蛋氨酸攝入之間P交互為0.01(結(jié)腸癌)，低蛋氨酸攝入并677T等位基因攜帶者結(jié)腸癌風(fēng)險顯著增高，OR值分別為4.06。TS3'-UTR多態(tài)與蛋氨酸攝入之間P交互分別為0.04(結(jié)腸癌)和0.03(直腸癌)，蛋氨酸中等攝入組中ins6等位基因攜帶者

16、和高攝入組中del6/del6基因型者結(jié)腸癌風(fēng)險下降，OR值分別為0.41和0.37。 結(jié)論本次以隊列人群為基礎(chǔ)的病例對照研究揭示：結(jié)腸癌的危險因素有年齡≥62歲、高中及以上文化程度、腸息肉史、結(jié)直腸炎史、血吸蟲病史、飲用烈性酒、被動吸煙、高能量攝入、MTHFR677CT基因型、MTR2756G等位基因；結(jié)腸癌的保護因素有職業(yè)為農(nóng)民，常吃桔、橘、橙類水果。直腸癌的危險因素有腸息肉史、結(jié)直腸炎史、血吸蟲病史、被動吸煙、喜食硬食、高

17、能量攝入、MTR2756G等位基因、MTRR66G等位基因；直腸癌的保護因素有常吃白菜類蔬菜，VitB2攝入量較高。TS5'-UTR多態(tài)和3'-UTR多態(tài)、吸煙史與MTRRA66G，吸煙年限與MTHFRC677T、吸煙年限與MTRRA66G、吸煙年限與TS5'-UTR多態(tài)，飲酒史與TS3'-UTR多態(tài)，飲酒年限與MTHFRC677T、飲酒年限與MTRA2756G、飲酒年限與MTRRA66G、飲酒年限與TS5'-UTR多態(tài)、飲酒年限與TS