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文檔簡介
1、第一部分 P COS大鼠模型的構(gòu)建以及吡格列酮抑制PC OS大鼠模型的構(gòu)建
目的:
1.構(gòu)建脫氫表雄酮(DHEA)誘導的幼年雌性 Wistar大鼠多囊卵巢綜合征(PCOS)模型。
2.探討吡格列酮是否影響DHEA誘導的PCOS大鼠模型的構(gòu)建。
方法:選取21日齡雌性Wistar大鼠40只,隨機數(shù)分成PCOS模型組(P組)、對照組(C組)、吡格列酮(艾可拓,Ac tos)干預(yù)組(P A組)和吡格列酮
2、組(A組),每組10只。P組大鼠于每日晨8時頸背部皮下注射 DHEA6mg/100 g+0.2 ml注射用無菌大豆油;C組大鼠于同時間頸背部皮下注射0.2 ml注射用無菌大豆油; PA組大鼠于同時間頸背部皮下注射DHEA6mg/100g+0.2ml注射用無菌大豆油,同時行吡格列酮生理鹽水溶液5mg/k g灌胃;A組大鼠于同時間行吡格列酮生理鹽水溶液5 mg/k g灌胃,連續(xù)干預(yù)20天。于干預(yù)的后10天連續(xù)行陰道涂片,觀察各組大鼠動情周期
3、的變化。干預(yù)結(jié)束后,測定血清睪酮(T)、空腹血糖(FBG)和空腹胰島素(FINS)并計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR);卵巢組織切片行蘇木素伊紅(HE)染色,觀察其形態(tài)學變化。
結(jié)果:
1.PCOS模型組大鼠失去規(guī)律的動情周期,而對照組大鼠具有規(guī)律的動情周期。與對照組相比,PCOS模型組大鼠 T、FINS和 HOMA-IR顯著升高,而 FBG無顯著差異。PCOS模型組大鼠卵巢組織切片 HE染色示多個囊狀擴張的卵泡,
4、其顆粒細胞層數(shù)減少甚至消失,另外發(fā)育階段卵泡數(shù)目明顯減少;對照組可見多個不同發(fā)育階段的卵泡,未見囊狀擴張的卵泡。
2.與PCOS模型組相比,吡格列酮干預(yù)組大鼠T、FINS和HOMA-IR顯著降低,而 FBG無顯著差異;并且表現(xiàn)規(guī)律的動情周期。吡咯列酮干預(yù)組大鼠卵巢組織切片 HE染色可見多個不同發(fā)育階段的卵泡,未見囊狀擴張的卵泡。
結(jié)論:1.DHEA誘導的幼年雌性 Wistar大鼠 PCOS模型卵巢形態(tài)以及血液內(nèi)分泌改
5、變與PCOS患者相似,是研究PCOS發(fā)病機制理想的動物模型。
2.吡格列酮可抑制DHEA誘導的PCOS大鼠模型的構(gòu)建。
第二部分吡格列酮對PC OS大鼠模型卵巢間質(zhì)細胞PP ARγ表達以及卵巢間質(zhì)M2型巨噬細胞分布的影響
?。ㄒ唬┻量┝型獙CO S大鼠模型卵巢間質(zhì)細胞PP ARγ表達的影響
目的:探討吡格列酮是否影響 DHEA誘導的PCOS大鼠模型卵巢間質(zhì)細胞PPARγ的表達。
方法:將
6、第一部分獲得的各組卵巢組織石蠟切片行免疫組織化學染色,使用Image Pro Plus6.0(IPP)圖像分析軟件測量卵巢間質(zhì)細胞PPARγ染色的平均光密度,使用SPSS20統(tǒng)計分析軟件對測量結(jié)果進行t檢驗。
結(jié)果: PCOS模型組大鼠卵巢間質(zhì)細胞 PPARγ平均光密度較對照組和吡咯列酮干預(yù)組顯著降低;吡格列酮干預(yù)組大鼠卵巢間質(zhì)細胞PPARγ平均光密度與吡格列酮組無顯著性差異;對照組大鼠卵巢間質(zhì)細胞PPARγ平均光密度與吡格列
7、酮組無顯著性差異。
結(jié)論:
1.正常大鼠單用吡格列酮不影響卵巢間質(zhì)細胞PPARγ的表達。
2.吡格列酮可增加 DHEA誘導的PCOS大鼠模型卵巢間質(zhì)細胞 PPARγ的表達。
?。ǘ┻粮窳型獙C OS大鼠模型卵巢間質(zhì)M2型巨噬細胞分布的影響
目的:探討吡格列酮是否影響DHEA誘導的PCOS大鼠模型卵巢間質(zhì)M2型巨噬細胞的分布。
方法:將第一部分獲得的各組卵巢組織切片行免疫組織化
8、學染色,計數(shù)卵巢間質(zhì) M2型巨噬細胞分布數(shù)量,從而獲得每組大鼠卵巢間質(zhì)單個高倍鏡下 M2型巨噬細胞分布的平均數(shù)量,使用SPSS20統(tǒng)計分析軟件對結(jié)果進行t檢驗。
結(jié)果:PCOS模型組大鼠卵巢間質(zhì) M2型巨噬細胞數(shù)較對照組和吡格列酮干預(yù)組顯著減少;吡格列酮干預(yù)組大鼠卵巢間質(zhì) M2型巨噬細胞數(shù)與吡格列酮組無顯著性差異;對照組大鼠卵巢間質(zhì) M2型巨噬細胞數(shù)與吡格列酮組無顯著性差異。
結(jié)論:
1.正常大鼠單用吡格列
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