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文檔簡介
1、目的:檢測DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑和口腔鱗癌組織中的表達情況,探討DPC4、P16及Bcl-2在口腔自斑癌變過程中變化及可能機制,且進一步了解DPC4與P16及Bcl-2的關(guān)系,為口腔癌前損害癌變的檢測、口腔鱗癌的早期診斷、治療選擇及預(yù)后等方面提供參考指標。
方法:取口腔白斑26例,口腔鱗癌30例和正??谇徽衬そM織10例。以4%的多聚甲醛固定,石蠟包埋,制成2μm切片,行免疫組織化學(xué)(polymer法和SAB
2、C法)檢測DPC4、P16及Bcl-2蛋白的表達變化,其中每組各10例中取部分組織立即存于液氮或-80℃超低溫冰箱用于提取RNA,進一步做熒光實時定量PCR檢測組織中DPC4 mRNA的表達。
結(jié)果:1.DPC4蛋白在10例正常口腔粘膜組織、26例口腔白斑及30例口腔鱗癌組織中表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義,正??谇徽衬そM織>白斑組織>鱗癌組織(P<0.01)。每組各10例中的DPC4 mRNA的表達水平亦有統(tǒng)計學(xué)差異,正常口腔粘膜
3、組織>白斑組織>鱗癌組織(P<0.01)。SABC法和熒光定量PCR對DPC4檢測結(jié)果一致性較好(Kappa=0.932>0.75)。2.Bcl-2蛋白在10例正??谇徽衬そM織、26例口腔白斑及30例口腔鱗癌組織中表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義,正??谇徽衬そM織<白斑組織<鱗癌組織(P<0.01)。3.P16蛋白在10例正??谇徽衬そM織、26例口腔白斑及30例口腔鱗癌組織中表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義,正??谇徽衬そM織>白斑組織>鱗癌組織(P<0.05)
4、。4.DPC4蛋白表達與Bcl-2蛋白表達呈負相關(guān)(r=-0.827,P<0.01);DPC4蛋白表達與P16蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.569,P<0.01)。
結(jié)論:1.DPC4蛋白和DPC4 mRNA的表達強度從正??谇徽衬そM、口腔白斑組到鱗癌組逐漸減弱,提示DPC4基因的缺失可能與口腔粘膜癌變有關(guān)。P16蛋白在口腔鱗癌組中的表達少于正??谇徽衬そM及白斑組,提示P16基因表達下降可能參與了口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展過程。Bcl
5、-2蛋白的表達隨著癌變程度增加而增加,表明Bcl-2蛋白的高表達有利于口腔粘膜癌變的發(fā)生。2.DPC4蛋白表達與Bcl-2蛋白表達呈負相關(guān),而與P16蛋白表達呈正相關(guān),提示了DPC4基因的缺失表達、P16基因的低表達和Bcl-2基因的過表達三者可能單獨或共同參與了口腔白斑癌變過程,可作為口腔白斑癌變檢測的指標。3.免疫組化法與熒光定量PCR法具有一致性,由于免疫組化對實驗設(shè)備要求不高,費用相對較低,可以通過這種方法對目的基因進行初步檢測
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