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文檔簡(jiǎn)介
1、目前產(chǎn)前診斷在許多國(guó)家是固定的產(chǎn)科檢查的一部分。然而,常規(guī)的獲得遺傳學(xué)分析的胎兒組織的方法是有創(chuàng)傷的并且是對(duì)胎兒有一定的風(fēng)險(xiǎn),這些方法包括羊膜腔穿刺和絨毛活檢被稱為侵入性產(chǎn)前診斷。非創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷早期主要研究將自孕婦外周血中富集、純化獲得的胎兒細(xì)胞用于產(chǎn)前診斷,然而母血循環(huán)中胎兒細(xì)胞是很稀少的,這一點(diǎn)限制了它的臨床應(yīng)用。自從1997年母親血漿中胎兒的游離DNA的發(fā)現(xiàn)為非創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷開辟了新的研究途徑,它已經(jīng)被用于產(chǎn)前診斷胎兒性別、胎兒
2、Rh血型以及產(chǎn)前診斷單基因缺陷病如β-地中海貧血,Huntington病、膽囊纖維化和強(qiáng)直性肌營(yíng)養(yǎng)不良等疾病。
母嬰血型不合而引起的新生兒溶血病(HDN)在臨床上較為常見,其發(fā)病率約為1%。可導(dǎo)致胎兒出生后核黃疸等后遺癥,甚至可引起胎兒官內(nèi)死亡。非創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷胎兒血型對(duì)預(yù)防血型不合導(dǎo)致的HDN有重要的意義。目前國(guó)外的研究主要集中在Rh血型系統(tǒng),關(guān)于ABO血型血型系統(tǒng)的產(chǎn)前診斷報(bào)道也甚少。Kidd、Duffy等血型系統(tǒng)的產(chǎn)
3、前診斷國(guó)內(nèi)外尚無(wú)報(bào)道。
本研究旨在建立適合中國(guó)人群的產(chǎn)前胎兒血型分子診斷的技術(shù)平臺(tái)。本研究的研究對(duì)象為不同孕期的孕婦,抽提其靜脈外周血血漿的DNA,應(yīng)用多重?zé)晒釶CR技術(shù)擴(kuò)增胎兒父源性STR位點(diǎn),確認(rèn)胎兒DNA的存在作為內(nèi)源胎兒標(biāo)記物;自母嬰血型不合的高危孕婦血漿中提取胎兒DNA,應(yīng)用PCR-SSP技術(shù)對(duì)胎兒ABO血型進(jìn)行分型;應(yīng)用RQ-PCR方法對(duì)胎兒RhCcEe和Kidd血型進(jìn)行分型。
STR研究結(jié)果為不
4、同孕期36份孕婦標(biāo)本中有32份檢測(cè)到了胎兒父源性STR等位基因。ABO檢測(cè)結(jié)果為39例O型血的孕婦標(biāo)本中,10例孕A型血胎兒的孕婦血漿中擴(kuò)增出A基因8例;6例孕B型血胎兒的孕婦血漿中擴(kuò)增出B基因6例;23例孕O型血胎兒擴(kuò)增出O基因而無(wú)A或B基因21例。RhCcEe檢測(cè)結(jié)果為21例孕婦樣本中,11例母親表型為ee純合子樣本檢測(cè)到胎兒E基因;12例母親表型為CC純合子檢測(cè)到胎兒c基因;5例母親表型為EE純合子檢測(cè)到胎兒e基因;9例母親表型為
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