外源性右旋糖酐酶和氟化鈉協(xié)同消解變形鏈球菌單菌種生物膜的研究.pdf

1、目的：觀察右旋糖酐酶及氟化鈉對(duì)變形鏈球菌單菌種生物膜初期形成和已形成的成熟生物膜結(jié)構(gòu)的影響，檢測二者作用下細(xì)菌的粘附情況以及胞外多糖含量的改變，探討二者是否具有協(xié)同作用，分析可能的作用機(jī)制。 方法： 1．變形鏈球菌在厭氧培養(yǎng)條件下于玻璃片表面上形成單菌種生物膜，用熒光染料BOBO<'TM>-3和Calcofluor<'TM>進(jìn)行染色，利用激光共聚焦顯微鏡觀察各處理因素作用下，變形鏈球菌初期形成生物膜的結(jié)構(gòu)的改變；以及各處

2、理因素對(duì)成熟變鏈生物膜作用后其結(jié)構(gòu)的變化。 2．利用<'2>H-TdR標(biāo)記細(xì)菌，檢測各處理因素對(duì)變鏈生物膜初期形成時(shí)細(xì)菌粘附的影響；蒽酮法檢測各處理因素作用于成熟變鏈生物膜后其胞外多糖含量的變化。 結(jié)果： 1．右旋糖酐酶能夠抑制變形鏈球菌單菌種生物膜的初期形成，使細(xì)菌的黏附減少，生物膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，破壞菌落之間的交聯(lián)；低濃度的氟化鈉對(duì)變鏈生物膜初期形成的作用不大；二者聯(lián)合應(yīng)用的效果優(yōu)于單獨(dú)作用，生物膜典型的樹枝

3、狀結(jié)構(gòu)消失；而氟化鈉或是氟離子對(duì)右旋糖酐酶本身的活性沒有影響。 2．對(duì)成熟變形鏈球菌生物膜：右旋糖酐酶能夠部分降解已合成的胞外多糖，使生物膜多糖“骨架”之間的連接變少，網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)被破壞；而低濃度的氟化鈉對(duì)已形成的變鏈生物膜幾乎沒有作用；二者聯(lián)用較單獨(dú)作用生物膜結(jié)構(gòu)改變更為明顯，生物膜被崩解，菌落之間的交聯(lián)破壞、減少，甚至消失，菌落散在，且胞外多糖含量的減少更顯著。 結(jié)論：右旋糖酐酶能抑制變形鏈球菌單菌種生物膜的初期形成，