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文檔簡介
1、目的:研究成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSC)的生物特性和發(fā)生,發(fā)育的規(guī)律,探討其在臨床應(yīng)用,體外擴(kuò)增的過程中的安全性,以及在臨床應(yīng)用的過程中是否會發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
方法:我們研究了體外培養(yǎng)的hMSC,在不同的培養(yǎng)時間點(diǎn),發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的敏感性。穿刺抽取10名健康志愿者的骨髓,分離提取得到hMSC,體外培養(yǎng)至衰老或需要傳代(P)25,8周至12周(hMSC的衰老期),干預(yù)終止之前,密切觀察監(jiān)視hMSC的變化。通過陣列比較基因組雜交
2、,常規(guī)核型分析和端粒熒光原位雜交,研究分析長期培養(yǎng)之前和之后干細(xì)胞的遺傳特性。檢測分析不同傳代次數(shù)和階段,hMSC端粒酶的表達(dá)活性,端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)的轉(zhuǎn)錄物,和端粒延長的具體機(jī)制。
結(jié)果:不同的志愿者之間,hMSC的增殖能力,和壽命有著巨大的變化。其中八個志愿者,hMSC增殖能力在衰老之前逐漸減弱。余下的兩個志愿者,為了進(jìn)行數(shù)據(jù)分析在P25階段,hMSC的培養(yǎng)被打斷。陣列比較基因組雜交陣列全息圖和細(xì)胞遺傳學(xué)分析
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