威靈仙多糖的分離純化及其活性研究.pdf

1、本論文對威靈仙多糖進(jìn)行分離純化，得到了兩種精制威靈仙多糖組分，并對其進(jìn)行了研究。研究主要內(nèi)容如下： 威靈仙粗多糖提取工藝的優(yōu)化。威靈仙藥材粉碎后，先用乙醇回流除去單糖、寡糖等小分子物質(zhì)，然后采用正交實驗設(shè)計考察了料液比、提取時間、提取溫度和醇沉濃度對粗多糖提取率的影響，并結(jié)合實際綜合考慮提取效率、多糖性質(zhì)等，最終確定最佳提取工藝：提取溫度80℃、料液比1:15、提取時間15h、乙醇濃度80％。 威靈仙多糖的分離純化。威靈

2、仙粗多糖經(jīng)脫色、除蛋白后再經(jīng)DEAE-SepharoseF.F分離，得到CCP-Ⅰ，CCP-Ⅱ，CCP-Ⅲ三個多糖組分。CCP-Ⅲ再經(jīng)Superdex-200柱層析分離，得到威靈仙精制多糖CCP-Ⅲa、CCP-Ⅲb。 威靈仙精制多糖 (CCP-Ⅲa、CCP-Ⅲb)的性質(zhì)及其結(jié)構(gòu)的初步研究。通過苯酚.硫酸法、間羥聯(lián)苯法、考馬斯亮蘭法、凝膠過濾法、瓊脂糖凝膠電泳、紫外掃描等方法對CCP-Ⅲa、CCP-Ⅲb進(jìn)行分析測定。采用紅外、紫外

3、、氣相色譜、高碘酸氧化等手段對CCP-Ⅲa、CCP-Ⅲb的結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步研究。結(jié)果如下：CCP-Ⅲa為均一組分，其總糖含量、糖醛酸含量、蛋白質(zhì)含量分別為92.4％、27.6％、6.9％；CCP-Ⅲb也為均一組分，其總糖含量、糖醛酸含量、蛋白質(zhì)含量分別為89.9％、39.5％、9.4％。它們的分子量分別為3.1×10<'5>Da、1.5×10<'5>Da。CCP-Ⅲa的單糖組成及摩爾比為：鼠李糖：阿拉伯糖：甘露糖：葡萄糖：半乳糖=4.7:1

4、:5.6:26.4:3.9；CCp-Ⅲb的單糖組成及摩爾比為：鼠李糖：甘露糖：葡萄糖：半乳糖=1.5:1.0:25.8:16.3。它們沒有典型的核酸和蛋白質(zhì)等吸收峰；糖苷鍵主要為β-構(gòu)型，且均含有1→3、1→6連接鍵型。 威靈仙多糖CCP-Ⅲ抗氧化活性研究。威靈仙多糖 CCP-Ⅲ具有清除羥基自由基和超氧陰離子自由基的作用，可顯著提高四氯化碳肝損傷小鼠血清和肝臟中SOD、GSH-PX活力，降低血清和肝臟中丙二醛(MDA)含量及肝臟