氧化苦參堿抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：本研究以膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（collagen-induced arthritis，CIA）大鼠模型為研究對象，以T淋巴細(xì)胞亞群Treg和Th17細(xì)胞的失衡為切入點，觀察氧化苦參堿對CIA大鼠關(guān)節(jié)腫脹度、關(guān)節(jié)評分和關(guān)節(jié)病理改變的影響。通過檢測血清IL-17A和TNF-α水平的變化及其對脾淋巴細(xì)胞Foxp3和RORγt mRNA和蛋白表達(dá)的影響，初步探討氧化苦參堿對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療作用及可能的免疫學(xué)分子機(jī)制，為其應(yīng)用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

2、的臨床治療提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。
　　方法： SD大鼠60只，體重200±20g，隨機(jī)取10只作為正常組，其余50只為實驗組并隨機(jī)分為五組，分別為：模型組、陽性藥物組（地塞米松組）、氧化苦參堿高、中、低劑量組，每組10只。（1）構(gòu)建CIA大鼠模型：實驗組50只SD大鼠分別構(gòu)建CIA模型，于每只SD大鼠右足趾皮下注射牛II型膠原與完全弗氏完全佐劑的混合乳劑0.1mL，一周后二次免疫加強(qiáng)，第8天開始腹腔注射不同濃度的氧化苦參堿及地塞

3、米松進(jìn)行治療。（2）HE染色觀察SD大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織變化：治療43天后處死SD大鼠，取各組大鼠的膝關(guān)節(jié)和踝關(guān)節(jié)固定、包埋、切片后行HE染色，觀察關(guān)節(jié)組織中滑膜的增生和炎癥變化；（3）采用ELISA法檢測各組大鼠血清中IL-17A和TNF-α的水平變化；（4）運用RT-PCR技術(shù)測定各組SD大鼠脾細(xì)胞中Foxp3 mRNA和RORγt mRNA的水平；（5）采用Western-blot法檢測氧化苦參堿對各組SD大鼠脾細(xì)胞中Foxp3和RO

4、Rγt蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：（1）氧化苦參堿可有效降低CIA大鼠的足爪腫脹程度和關(guān)節(jié)炎指數(shù)。（2）氧化苦參堿可明顯的減輕CIA大鼠關(guān)節(jié)滑膜的增生。（3）氧化苦參堿可顯著降低CIA大鼠血清中炎癥因子TNF-α和IL-17A的水平。（4）氧化苦參堿可抑制Th17細(xì)胞基因RORγt mRNA的水平而促進(jìn)Terg細(xì)胞特異性基因Foxp3 mRNA的水平。（5）氧化苦參堿可抑制RORγt蛋白的表達(dá)而促進(jìn)Foxp3蛋白的表達(dá)。