氯化鎳對(duì)雛雞脾臟免疫功能影響的研究.pdf

1、本研究選用1日齡艾維茵肉雞(AA)健雛240只，隨機(jī)分成4組，分別飼以對(duì)照日糧和高鎳日糧（高鎳Ⅰ組:300 mg/kg，高鎳Ⅱ組:600 mg/kg，高鎳Ⅲ組:900 mg/kg，鎳源:氯化鎳，NiCl2），自由飲水，飼喂42天。采樣時(shí)間為14，28和42日齡。以實(shí)驗(yàn)病理學(xué)、TUNEL、流式細(xì)胞術(shù)、熒光定量PCR和ELISA等方法研究日糧中添加不同水平氯化鎳對(duì)雛雞脾臟免疫功能的影響。結(jié)果如下:
　　1.與對(duì)照組比較，高鎳組雛雞體重

2、增長(zhǎng)減慢，脾臟體積減小、重量減輕。白髓中淋巴細(xì)胞數(shù)量減少;超微結(jié)構(gòu)觀察可見(jiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張和核膜擴(kuò)張，凋亡細(xì)胞增多。
　　2.脾臟超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，谷胱甘肽(GSH)含量顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，丙二醛(MDA)含量顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)，抑制羥自由基能力下降(P＜0.05或P＜0.01)。
　

3、　3.TUNEL染色結(jié)果與流式結(jié)果顯示，脾臟淋巴細(xì)胞凋亡數(shù)量和凋亡率顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)，凋亡蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3 mRNA表達(dá)水平和含量顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)。
　　4.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示，CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞百分率不同程度下降，CD4+/CD8+比例降低。IgA+B細(xì)胞數(shù)量顯著減少(P＜0.05或P＜0.01)。
　　5.脾臟白

4、細(xì)胞介素（interleukin IL，IL-2、IL-6、IL-10、IL-12），腫瘤壞死因子α(Tumornecrosis factor，TNF-α/LITAF)，干擾素γ(Interferon，IFN-γ) mRNA表達(dá)水平和含量均顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)，免疫球蛋白(immunoglobulin Ig，IgA、IgG、IgM)含量顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)。
　　6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quan

5、titative real-time polymerase chain reaction)結(jié)果表明:Toll樣受體（Toll-like receptor TLR，TLR4和TLR7）的基因表達(dá)水平均顯著下調(diào)(P＜0.05或P＜0.01)。
　　研究結(jié)果表明日糧中氯化鎳超過(guò)300 mg/kg時(shí)脾臟會(huì)發(fā)生以下變化:①SOD、CAT、GSH-Px活性下降，GSH含量減少，抑制羥自由基能力下降，MDA含量顯著上升，引起脾臟氧化損傷;②鎳的

6、攝入引起脾臟淋巴細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受損，凋亡細(xì)胞增多，造成脾臟的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫功能受損;③細(xì)胞因子(IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α/LITAF、IFN-γ) mRNA表達(dá)下調(diào)、含量降低，CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞比例下降，表明T淋巴細(xì)胞數(shù)量減少和功能受損，細(xì)胞免疫功能受到抑制;④IgA+B細(xì)胞數(shù)量減少及IgA、IgG、IgM含量降低，表明B淋巴細(xì)胞和體液免疫功能受損;⑤TLR4和TLR7 mRNA表達(dá)下調(diào)，表明脾臟非特