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文檔簡(jiǎn)介
1、目的
探討腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)對(duì)高糖誘導(dǎo)的人腎小球系膜細(xì)胞(human mesangial cells,HMCs)炎癥反應(yīng)和細(xì)胞外基質(zhì)的影響及a-硫辛酸的干預(yù)作用。
方法
傳代培養(yǎng)的HMCs同步化后分組:正常糖對(duì)照組、高糖組、甘露醇對(duì)照組、高糖+a-硫辛酸處理組(a-硫辛酸濃度分別為50、100、200μmol/L),于實(shí)驗(yàn)0h
2、、12h、24h、48h、72h收集各組細(xì)胞及上清液,采用RT-PCR法和ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞中AMPKmRNA及上清液中AMPK、髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、a-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth musele actin,a-SMA)的含量。
結(jié)果
1、高糖組人腎小球系膜細(xì)胞AMPKmRNA及AMPK蛋白的表達(dá)較正常糖對(duì)照組明顯下降(P<0.01),MPO、a-SMA
3、蛋白的表達(dá)明顯增加(P<0.01)。
2、α-硫辛酸各處理組比高糖組AMPKmRNA及AMPK蛋白表達(dá)有明顯增加(P<0.01),MPO、a-SMA蛋白的分泌較處理前明顯降低(P<0.05)。
結(jié)論
高糖能夠抑制人腎小球系膜細(xì)胞中AMPK的表達(dá),誘導(dǎo)MPO(炎癥反應(yīng)指標(biāo))、a-SMA(系膜細(xì)胞活化從而分泌細(xì)胞外基質(zhì)增多的指標(biāo))的表達(dá),抗氧化劑a-硫辛酸可以上調(diào)高糖抑制的AMPK的表達(dá),減少高糖刺
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