針刺對(duì)血管性癡呆大鼠海馬Ref-1上下游調(diào)控分子的影響.pdf

1、目的：觀察針刺對(duì)血管性癡呆大鼠海馬Ref-1上下游調(diào)控分子的影響，探討針刺Ref-1信號(hào)通路的抗氧化機(jī)制。
　　方法：Wistar大鼠82只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、針刺組和非穴組。選擇雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷法復(fù)制血管性癡呆大鼠模型，造模后第3天針刺，針刺組選取百會(huì)穴和雙側(cè)足三里穴行捻轉(zhuǎn)補(bǔ)法各30s。非穴組選取雙側(cè)肋下兩個(gè)固定非穴點(diǎn)（肋下髂嵴上10 mm、15mm），作為對(duì)照刺激點(diǎn)，采用平補(bǔ)平瀉的捻轉(zhuǎn)手法刺激各30s。每日針刺1次，治

2、療6天，休息1天，2周共治療12次。假手術(shù)組和模型組進(jìn)行與針刺組和非穴組相同時(shí)間、相同程度的捉抓刺激。針刺治療結(jié)束后，采用Western blotting技術(shù)檢測(cè)各組大鼠海馬磷酸化CKⅡ蛋白表達(dá)水平；采用凝膠遷移（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）方法檢測(cè)各組大鼠海馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性；采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)各組大鼠海馬HIF-1α蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：（1）與

3、假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬磷酸化CKⅡ水平顯著下降（P<0.05）；與模型組比較，針刺組和非穴組大鼠海馬磷酸化CKⅡ水平顯著升高（P<0.05）；與非穴組相比，針刺組大鼠海馬磷酸化CKⅡ水平顯著升高（P<0.05）；（2）與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性顯著升高（P<0.05)；與模型組相比，針刺組和非穴組大鼠海馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性顯著降低（P<0.05）；與非穴組相比，針刺組大鼠海

4、馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性顯著降低（P<0.05）；（3）與假手術(shù)組比較，模型組海馬HIF-1α蛋白表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）；與模型組比較，針刺組和非穴組海馬HIF-1α蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）；與非穴組相比，針刺組海馬HIF-1α蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）。
　　結(jié)論:針刺通過(guò)提高海馬Ref-1上游CKⅡ的磷酸化表達(dá)水平，降低海馬Ref-1下游AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性和HIF