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文檔簡介
1、本實驗通過復制黃河水淹溺動物模型,觀察淡水淹溺對腦組織的損傷。探討溺水后大鼠腦內(nèi)缺氧誘導因子(HIF-1α)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)與溺水腦損傷的關(guān)系及兩者的相關(guān)性。探索細胞因子在溺水所致腦損傷發(fā)生中的分子病理機制,為臨床開辟細胞因子治療新途徑提供實驗依據(jù)。 方法: 1分組將Wistar大鼠70只,隨機分為三組,即:Ⅰ正常對照組,動物10只,不經(jīng)淹溺處理;Ⅱ淹溺致死組,動物10只,將大鼠直接淹溺致死;Ⅲ淹溺非致死組
2、,動物50只,,淹溺2分鐘后分別于存活3、6、12、24及40h時間點,各取10只處死。各組動物按實驗要求行相關(guān)指標檢測。 2用經(jīng)皮血氧飽和度監(jiān)測儀動態(tài)檢測動物正常時、淹溺后即刻、10、30分鐘和1、3、6、12、24及40h的血氧飽和度,以了解體內(nèi)缺氧狀況。 3將各組腦組織作石蠟切片,行HE染色觀察淹溺后腦組織形態(tài)學改變。 4采用免疫組織化學方法檢測各組大鼠腦組織HIF-1α和VEGF的表達。 結(jié)果:
3、 1腦指數(shù)的各組間差異有統(tǒng)計意義,P<0.05。正常對照組腦指數(shù)為6.87±0.78,淹溺致死組腦指數(shù)與正常對照組相比明顯增加,P<0.05;溺水后存活3、12h的動物腦指數(shù)明顯小于淹溺致死組,P<0.05;而溺水24和40h者與致死組相比有所降低,但P>0.05。 2正常時血氧飽和度為97±2%;淹溺后即刻血氧飽和度為52±5%,以后逐漸上升,到12h后已基本恢復正常。氧飽和度各時間點間的差異有統(tǒng)計學意義,P<0.05。
4、 3腦組織形態(tài)學示正常對照組腦細胞結(jié)構(gòu)清晰,無水腫及出血;淹溺致死組腦組織疏松,腦實質(zhì)小血管旁間隙及神經(jīng)細胞周圍間隙增寬,部分神經(jīng)細胞體積略增大,有腦水腫表現(xiàn);淹溺非致死組腦水腫于溺水后3h出現(xiàn),12至24h逐漸加重,24h最重,40h水腫較前略有減輕,并伴部分腦細胞變性、壞死和出血。 4免疫組織化學染色示正常對照組腦組織無HIF-1α表達,VEGF表達陽性(+);淹溺致死組HIF-1α表達陽性(+),VEGF陽性(+)
5、;非致死組兩者都于淹溺后3h表達明顯,到12h呈高峰表達(+++),以后逐漸下降。各組間HIF-1α和VEGF表達的差異均具有統(tǒng)計學意義,并且兩者呈正相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論: 1淡水淹溺后機體內(nèi)出現(xiàn)的缺氧性腦損傷是與疾病進展程度及預后密切相關(guān)的嚴重病變,但并非是導致溺死的直接原因。 2細胞因子HiF-1α在淹溺非致死機體呈高表達,并調(diào)節(jié)其下游基因VEGF的表達增強,對腦組織產(chǎn)生保護作用,但隨著缺氧狀態(tài)的糾正兩者的表達逐
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