基于Tyr側(cè)鏈連接的固相肽合成方法探計與紫杉醇-多肽偶合物的合成.pdf

1、多肽類藥物具有藥效高、生物利用度好、副作用小且不易蓄積等優(yōu)點。固相多肽合成是多肽重要的獲得途徑之一，但傳統(tǒng)的固相合成法在修飾肽鏈C端時，存在某些不足，不能方便地在肽鏈N端、C端分別進行衍生化或同時進行衍生化?；趥?cè)鏈連接的固相多肽合成法為解決這一問題提供了一種選擇。本文設(shè)計了一種基于Tyr側(cè)鏈連接的固相多肽合成方法，將酪氨酸的側(cè)鏈酚羥基與Wang樹脂的活性羥基通過Mitsunobu反應(yīng)實現(xiàn)連接，使氨基酸的N端和C端同時裸露;肽鏈N端采用

2、Fmoc基團保護，用20％哌啶/DMF脫保護;肽鏈C端采用甲酯保護，用0.1M LiOH四氫呋喃/水溶液脫保護;肽鏈N端與C端的酰胺縮合統(tǒng)一采用PyBOP/DIEA作為縮合試劑。我們采用上述固相合成方法，成功合成了八個三肽和一個五肽衍生物;通過高效液相和質(zhì)譜，對合成過程中的重要中間體和終產(chǎn)物進行了分析，驗證了該方法的可行性。
　　紫杉醇是靶向腫瘤微管的抗癌藥物，在臨床上廣泛用于肺癌、胃癌等多種癌癥的治療。奧曲肽、Tyr3-奧曲肽、

3、伐普肽是人工合成的生長抑素衍生物。由于生長抑素受體(SSTR)亞型Ⅱ(SSTR2)在腫瘤中廣泛分布，而且SSTR2亞型對奧曲肽等生長抑素衍生物有選擇性。因此，我們以三種生長抑素類似物奧曲肽、Tyr3-奧曲肽、伐普肽作為載體，設(shè)計了紫杉醇-多肽偶合物，旨在進一步提高紫杉醇的腫瘤選擇性，改善生物利用度，降低不良反應(yīng)。我們在紫杉醇分子中選擇性地引入丁二酸單元，通過酰胺鍵與奧曲肽、Tyr3-奧曲肽、伐普肽偶聯(lián)，合成了(PTX)2-octreot

4、ide、(PTX)2-Tyr3-octreotide、(PTX)2-vapreotide偶合物。通過MTT法，評價了這些紫杉醇-多肽偶合物對HeLa細胞、A549細胞、MCF-7細胞、K562細胞的生長抑制作用。其中，化合物(PTX)2-octreotide和(PTX)2-Tyr3-octreotide對腫瘤細胞具有良好的抑制活性，對HeLa細胞的IC50值分別為4.23nM和4.17nM，對A549細胞的IC5o值分別為30.11nM