沉默信息調(diào)節(jié)因子1在大鼠酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)理中的作用.pdf

1、目的:酒精性脂肪性肝病(alcoholic fatty liver disease，AFLD)是長期大量飲酒所致的肝臟早期病變，可進(jìn)一步發(fā)展為酒精性脂肪性肝炎、肝纖維化甚至肝硬化。在動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn):慢性酒精攝入可以影響機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)代謝的重要調(diào)節(jié)因子脂聯(lián)素(adiponectin，Adip)-沉默信息調(diào)節(jié)因子1(silentinformation regulator1，SIRTI)-腺苷酸活化蛋白激酶(adenosinemonophosph

2、ate activated protein kinase，AMPK)軸的功能。脂聯(lián)素是由脂肪細(xì)胞對(duì)各種代謝信號(hào)應(yīng)答時(shí)特異性分泌的一種膠原樣血漿蛋白，具有兩種脂聯(lián)素受體(adiponectin recpetor, AdipoR)分別為AdipoR1和AdipoR2。而這兩個(gè)受體正是脂聯(lián)素傳遞信號(hào)的信使從而增加脂肪酸氧化并減少臟器的脂肪沉積。在部分動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中，慢性酒精攝入可以明顯減少脂聯(lián)素以及肝臟脂聯(lián)素受體的mRNA表達(dá)。SIRT1也是

3、肝臟脂質(zhì)代謝過程中的重要調(diào)節(jié)因子，用脂聯(lián)素刺激H4IIEC3細(xì)胞能夠明顯增加SIRT1的蛋白表達(dá)。而SIRT1表達(dá)上調(diào)的同時(shí)還伴隨著磷酸化的AMPK的表達(dá)升高。本研究旨在探討脂聯(lián)素(Adip)-沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)-腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信號(hào)通路在大鼠酒精性肝病發(fā)病機(jī)理中的作用。
　　方法:雄性Wistar大鼠50只，隨機(jī)分為模型組和對(duì)照組，模型組采用酒精灌胃法建立大鼠酒精性肝病(ALD)模型，分別于4、8、1

4、2和16周末隨機(jī)分批處死，檢測其血清Adip和TNF-α;應(yīng)用蘇木素-伊紅、天狼紅及蘇丹Ⅳ染色觀察肝組織病理變化;分別應(yīng)用RT-PCR和Western bloting法檢測SIRT1、AMPK、脂聯(lián)素受體(Adip R)、固醇調(diào)節(jié)原件結(jié)合蛋白（SREBP）和乙酰輔酶A羧化酶(ACC) mRNA和蛋白表達(dá)水平;同時(shí)免疫組織化學(xué)法檢測肝組織SIRT1、AMPK、SREBP及其ACC表達(dá)。多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用Pea

5、rson相關(guān)分析。
　　結(jié)果:隨著造模時(shí)間延長，大鼠血清TNF-α水平逐漸升高，而Adip水平逐漸降低，二者呈負(fù)相關(guān)(r=-0.91 p＜0.01);16周末大鼠出現(xiàn)肝細(xì)胞彌漫小泡性脂肪變性，竇周纖維化，匯管區(qū)纖維組織增生并有纖維間隔形成;模型16周組肝組織中SIRT1、AMPK和Adip R2 mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為(0.21±0.05)、(0.50±0.09)和（0.19±0.06），顯著低于0周組的（1.12±0.18）、

6、（0.84±0.14）和（0.69±0.19），（均p＜0.01），而ACC（1.13±0.08）及SREBP（1.03±0.06）表達(dá)明顯高于0周組（0.62±0.15）和（0.53±0.09）（均p＜0.01）;蛋白質(zhì)表達(dá)趨勢與mRNA變化趨勢相一致。
　　結(jié)論:酒精抑制Adip-SIRT1-AMPK信號(hào)通路導(dǎo)致下游脂代謝調(diào)節(jié)因子異常表達(dá)，使得肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝紊亂而發(fā)生脂質(zhì)沉積，這可能為酒精性脂肪性肝病發(fā)生的重要機(jī)制之一。