去勢(shì)大鼠AD樣學(xué)習(xí)記憶障礙的機(jī)制探討.pdf

1、目的：
　　通過(guò)對(duì)SD大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù)(bilaterally ovariectomized),建立低雌激素水平動(dòng)物模型,觀察去勢(shì)后大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的變化,并通過(guò)檢測(cè)大鼠體重、子宮重量、血液中雌二醇水平、海馬區(qū)tau蛋白(在Thr231、Ser396和Ser404位點(diǎn)磷酸化水平以及tau-1和tau-5的含量的變化)和Cdk5及其重要調(diào)節(jié)亞基p25、p35表達(dá)水平變化,探討去勢(shì)誘導(dǎo)大鼠AD樣學(xué)習(xí)記憶障礙的可能機(jī)制,從而為該去勢(shì)

2、模型應(yīng)用于基礎(chǔ)研究提供更為詳細(xì)的證據(jù),為從雌激素途徑尋求治療阿爾茨海默病提供新的切入點(diǎn)。
　　方法：
　　選用三月齡清潔級(jí)SD雌性大鼠24只,體重220±30g(由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供),標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),自由飲水,室溫保持在(24±2)℃,相對(duì)濕度60±5％,光線按正常晝夜節(jié)律調(diào)節(jié),在動(dòng)物房適應(yīng)1周。將動(dòng)物隨機(jī)分為2組,假手術(shù)組(Sham)和去勢(shì)組(OVX),去勢(shì)組行雙側(cè)卵巢切除術(shù)完全摘除卵巢,假手術(shù)組僅切除

3、卵巢旁部分脂肪組織。在去勢(shì)后第七周開(kāi)始進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練,連續(xù)訓(xùn)練7天,于訓(xùn)練的最后一天對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行學(xué)習(xí)能力的檢測(cè),休息6天后,對(duì)訓(xùn)練后的大鼠進(jìn)行MORRIS水迷宮記憶能力方面的測(cè)試,并于測(cè)試完成一天后稱重并取材,檢測(cè)子宮重量、血液中雌二醇的水平,用WesternBlot分析海馬組織tau蛋白在Thr231、Ser396和Ser404位點(diǎn)磷酸化水平以及tau-1(與Ser198/Ser199/Ser202非磷酸化的tau蛋白結(jié)合)和tau

4、-5(與磷酸化和非磷酸化的tau均結(jié)合,代表總tau蛋白的水平)的含量,同時(shí)檢測(cè)分析Cdk5蛋白及其重要的調(diào)節(jié)亞基p25/Cdk5的相對(duì)水平。
　　結(jié)果：
　　去勢(shì)后第七周,通過(guò)MORRIS水迷宮測(cè)試,我們發(fā)現(xiàn)在學(xué)習(xí)期間去勢(shì)組大鼠尋找平臺(tái)潛伏期于第6、7兩天明顯比假手術(shù)組長(zhǎng)(p?0.05),休息6天后我們檢測(cè)記憶能力,發(fā)現(xiàn)去勢(shì)組尋找平臺(tái)潛伏期也明顯比假手術(shù)組長(zhǎng)(p?0.05);經(jīng)過(guò)測(cè)量大鼠血液中雌二醇水平以及體重、子宮重量等

5、數(shù)據(jù)我們發(fā)現(xiàn),去勢(shì)組大鼠雌二醇水平及子宮重量明顯比假手術(shù)組低(p?0.05),其體重明顯比假手術(shù)組要高(p?0.05);WesternBlot分析發(fā)現(xiàn),去勢(shì)組海馬組織tau蛋白在Thr231、Ser396位點(diǎn)磷酸化水平明顯增高(p?0.05),tau-1在去勢(shì)組中表達(dá)水平明顯較低(p?0.05);海馬組織p25/Cdk5的相對(duì)水平在去勢(shì)組是明顯升高(p?0.05)。
　　結(jié)論：
　　雙側(cè)卵巢切除可以導(dǎo)致大鼠出現(xiàn)AD樣空間學(xué)習(xí)