自噬體-溶酶體系統(tǒng)與2型糖尿病關(guān)系的研究.pdf

1、目的：自噬體-溶酶體系統(tǒng)是細(xì)胞利用溶酶體降解自身受損的細(xì)胞器和大分子物質(zhì)的過程，是真核細(xì)胞特有的生命現(xiàn)象，在細(xì)胞的生長、發(fā)育和疾病發(fā)生中起著重要的作用。自噬消化過程既廣泛存在于正常的生理過程中，又是細(xì)胞對(duì)不良環(huán)境的一種防御機(jī)制，同時(shí)還參與多種疾病的病理過程，無論是自噬過度還是自噬不足都可能導(dǎo)致疾病發(fā)生。 目前研究表明，自噬體-溶酶體系統(tǒng)異常與腫瘤、神經(jīng)退行性疾病以及病原微生物的入侵等相關(guān)。但自噬體-溶酶體系統(tǒng)與2型糖尿?。═2D

2、M）發(fā)病相關(guān)性的研究尚少。有研究認(rèn)為自噬體-溶酶體系統(tǒng)與T2DM相關(guān)，該系統(tǒng)數(shù)量與功能改變時(shí)，都會(huì)影響T2DM的發(fā)生與發(fā)展，但是目前研究報(bào)道結(jié)果尚不一致。 本研究旨在研究自噬體-溶酶體系統(tǒng)在T2DM患者體內(nèi)的變化，探討其在T2DM發(fā)生、發(fā)展中的作用，從而為2型糖尿病的病因、干預(yù)與治療提供理論基礎(chǔ)。 方法：本研究收集自2007年12月至2008年4月期間在濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科病房住院確診的T2DM患者作為病例組，從醫(yī)

3、院健康查體中心選取相同年齡組健康者作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)采用病例-對(duì)照觀察，分為健康對(duì)照組、T2DM組和微血管并發(fā)癥組，各40例，共計(jì)120例，其中對(duì)照組男22例，女18例，平均年齡55.72歲，糖尿病組男24例，女16例，平均年齡51.2歲；并發(fā)癥組男21例，女19例，平均年齡55.08歲。 收集外周血液標(biāo)本并分離白細(xì)胞，分別提取蛋白及RNA，分別用免疫蛋白印跡（western blot）及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）方法，

4、對(duì)自噬體特異性標(biāo)記LC3及溶酶體特異性標(biāo)記LAMP2進(jìn)行檢測(cè)，從而觀察自噬體-溶酶體數(shù)量的變化。所有數(shù)據(jù)輸入采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，設(shè)P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：western blot及RT-PCR結(jié)果均顯示，對(duì)照組、T2DM組及并發(fā)癥組之間自噬體的數(shù)量呈遞減趨勢(shì)，對(duì)照組與T2DM組及對(duì)照組與并發(fā)癥組之間均有明顯差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而T2DM組與并發(fā)癥組之間無明顯差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三

5、組間溶酶體有下降趨勢(shì)，但無明顯差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多因素非條件Logistic回歸分析結(jié)果：與2型糖尿病發(fā)生、發(fā)展成正相關(guān)的指標(biāo)有年齡、FBG、TG、TC及LDL，成負(fù)相關(guān)的有自噬體數(shù)量及尿酸，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05） 結(jié)論：自噬體數(shù)量的改變對(duì)T2DM及其并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展之間存在顯著相關(guān)性，自噬體對(duì)糖尿病患者有保護(hù)作用。在2型糖尿病患者及其合并并發(fā)癥患者體內(nèi)自噬體數(shù)量是減少的，自噬體的數(shù)量減少使糖尿病患者胰腺β細(xì)胞內(nèi)受損

6、的細(xì)胞器得不到及時(shí)清除，從而不能維持胰島β細(xì)胞功能，異常的、畸形的及功能缺陷的β細(xì)胞線粒體以及膨脹的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的存在可能會(huì)降低細(xì)胞產(chǎn)生胰島素的能力，導(dǎo)致糖尿病的加重及其并發(fā)癥的發(fā)生。雖然三組間溶酶體數(shù)量有下降趨勢(shì)，但無顯著性差異。這可能與溶酶體變異較大有關(guān)，另外溶酶體不僅接受來自自噬體的物質(zhì)，也同樣肩負(fù)內(nèi)源性和外源性大分子物質(zhì)的消化。因此，雖然我們未觀察到本組病人中溶酶體數(shù)量的顯著變化，尚不能排除溶酶體與T2DM之間的相關(guān)關(guān)系。年齡、肥胖、