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1、自從經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)(PTCA)出現(xiàn)之后,血管內(nèi)支架在治療梗塞性冠狀動(dòng)脈疾病方面,一直是主要的發(fā)展方向之一。其中藥物洗脫性支架的開發(fā)是一個(gè)熱點(diǎn),它是將支架作為媒介提供延時(shí)的,并且足夠量的藥物釋放,通過藥物的作用來抑制支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生,因此藥物釋放特性的評(píng)估是藥物洗脫支架研究的重中之重。本文利用自制藥物洗脫支架體外釋放檢測(cè)裝置,以國(guó)內(nèi)自主研發(fā)的抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)單克隆抗體為目標(biāo)藥物制備單抗洗脫性血管內(nèi)支架
2、,初步評(píng)估了單抗洗脫支架的體外藥物緩釋特性和藥物分布狀況。
首先,設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)了單抗洗脫性血管內(nèi)支架體外釋放檢測(cè)裝置,并對(duì)其進(jìn)行了改進(jìn)。該實(shí)驗(yàn)裝置包括動(dòng)力部分、載支架部分、溫度控制部分和循環(huán)通路部分,改進(jìn)型裝置在此基礎(chǔ)上新增了載氣部分和壓力控制部分。其中動(dòng)力部分為蠕動(dòng)泵;載支架部分為玻璃流動(dòng)腔,改進(jìn)后可接入動(dòng)脈血管;溫度控制部分為水浴鍋,后改進(jìn)為人工氣候箱;循環(huán)通路部分由硅膠軟管、儲(chǔ)液瓶以及沈脫緩沖液組成;載氣部分包括氧氣瓶
3、、壓力表和流量?jī)x;壓力控制部分為膜盒壓力儀。
然后,利用前期體外釋放檢測(cè)裝置,對(duì)單抗洗脫血管內(nèi)支架進(jìn)行了體外藥物緩釋實(shí)驗(yàn)研究。聚乳酸涂層支架浸泡在經(jīng)125Ⅰ放射性標(biāo)記的GPⅡb/Ⅲa單抗溶液中制備單抗洗脫性血管內(nèi)支架,測(cè)定支架的載藥量。同時(shí),利用前期體外釋放檢測(cè)裝置,對(duì)單抗洗脫性支架進(jìn)行了體外洗脫實(shí)驗(yàn),測(cè)定了緩釋時(shí)間,評(píng)價(jià)了緩沖液的流量等相關(guān)因素對(duì)緩釋的影響。
最后,利用改進(jìn)型體外釋放檢測(cè)裝置,對(duì)單抗洗脫血管
4、內(nèi)支架進(jìn)行了體外藥物分布實(shí)驗(yàn)研究。聚乳酸涂層支架浸泡在經(jīng)FITC熒光標(biāo)記的GPⅡb/Ⅲa單抗溶液中制備單抗洗脫性血管內(nèi)支架,熒光顯微鏡拍照定性評(píng)價(jià)熒光標(biāo)記的效果。檢測(cè)動(dòng)脈血管于改進(jìn)型體外釋放檢測(cè)裝置中保持組織活性的最長(zhǎng)時(shí)間,以確立體外實(shí)驗(yàn)的最佳時(shí)間。以此為基礎(chǔ),利用改進(jìn)型體外釋放檢測(cè)裝置,評(píng)估了不同時(shí)間點(diǎn)的藥物在動(dòng)脈血管和血管支架上的分布情況。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本文設(shè)計(jì)的單抗洗脫支架體外釋放檢測(cè)裝置取樣方便,結(jié)合放射性檢測(cè)方
5、法和免疫熒光檢測(cè)方法,結(jié)果準(zhǔn)確,穩(wěn)定性良好,基本滿足了實(shí)驗(yàn)需求。支架的吸附和洗脫實(shí)驗(yàn)顯示了支架的載藥和釋藥特性,支架的載藥量一般可達(dá)到幾十微克;支架的藥物釋放時(shí)間可達(dá)到2個(gè)星期,緩沖液的流量對(duì)藥物的釋放有一定的影響。單抗的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示單抗在支架上分布均勻,證明了Chadwick熒光標(biāo)記法的可行;單抗洗脫支架的體外分布實(shí)驗(yàn)顯示動(dòng)脈血管在8h內(nèi)可以在改進(jìn)型體外釋放檢測(cè)裝置中保持組織活性,單抗洗脫支架體外植入后8h內(nèi)支架上藥物未見明顯
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