4-1BBL-B7-H3基因?qū)γ庖咧亟üδ躍CID荷瘤鼠的抑瘤作用.pdf

1、目的：建立人免疫重建荷口腔鱗癌重癥聯(lián)合免疫缺陷鼠（severe combined immune deficiency mice，SCID）嵌合模型,并探討4-1BBL-B7-H3基因在非特異性抗腫瘤免疫中的作用。
　　方法：將40只小鼠隨機(jī)分為5組（4雌+4雄為一組）。對(duì)照組(A組)：免疫重建+注射Tca8113細(xì)胞；Ad4-1BBL-B7-H3組（B組）：免疫重建+注射含有人4-1BBL-B7-H3基因腺病毒轉(zhuǎn)染的Tca8113

2、細(xì)胞；空載組（C組）：免疫重建+注射含有空載體腺病毒轉(zhuǎn)染的Tca8113細(xì)胞；非免疫重建組（D組)：不給予小鼠免疫重建，注射Tca8113細(xì)胞；非腫瘤組（E組）：免疫重建+背部皮下注射PBS。每周定期測(cè)量腫瘤體積；ELISA法檢測(cè)人IgG蛋白含量；流式細(xì)胞儀檢測(cè)SCID鼠外周血中人CD3+、CD56+NKT淋巴細(xì)胞比例;DAB顯色法觀察自然殺傷細(xì)胞2族成員D(natural killer group2 member D,NKG2D)和T

3、oll樣受體2(Toll-like receptor2,TLR2)在各組小鼠腫瘤中表達(dá)的差異;RT-PCR檢測(cè)腫瘤中4-1BBL-B7-H3mRNA的表達(dá)，RT-qPCR檢測(cè)腫瘤組織中主要組織相容性復(fù)合體1類相關(guān)分子A(major histocompatibility complex1 class related molecule A,M1CA)、主要組織相容性復(fù)合體1類相關(guān)分子B(major histocompatibility co

4、mplex1 class related molecule B,M1CB)和TLR2 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：①人4-1BBL-B7-H3組小鼠腫瘤體積小于其它組(P<0．05)，腫瘤生長(zhǎng)明顯受到抑制；②第三、五、七周可在免疫重建組小鼠外周血中測(cè)得人IgG；③人4-1BBL-B7-H3組腫瘤中MICA和TLR2表達(dá)顯著增高，MICB的表達(dá)較余各組無(wú)顯著差異；④RT-PCR證明人4-1BBL-B7-H3基因在4-1BBL-B7-

5、H3組小鼠瘤體內(nèi)充分表達(dá)；⑤DAB顯色法觀察到人4-1BBL-B7-H3組小鼠腫瘤組織中NKG2D和TLR2的表達(dá)較其余各組明顯增高；⑥免疫重建鼠均能檢測(cè)到 CD3+、CD56+NKT細(xì)胞，人4-1BBL-B7-H3組高于其它組（P＜0.05）。
　　結(jié)論：4-1BBL-B7-H3基因在腫瘤組織的表達(dá)增強(qiáng)能成功誘導(dǎo)人CD3+、CD56+NKT細(xì)胞增殖，直接或間接活化TLR2，上調(diào)NKG2D及其配體MICA,MICB的表達(dá)，產(chǎn)生有效

6、的抗腫瘤免疫應(yīng)答。
　　目的：探討UCA1 mRNA在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與舌鱗癌病理分級(jí)和臨床分期關(guān)系。
　　方法：采用SYBR Green II實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)方法從6種基因中篩選出在40對(duì)舌鱗癌組織及配對(duì)正常舌組織樣本中表達(dá)有明顯差異的基因 UCA1，擴(kuò)大樣本量至94例，檢測(cè)UCA1 mRNA在兩者中的表達(dá)。應(yīng)用SPSS13.0軟件包統(tǒng)計(jì)分析UCA1 mRNA表達(dá)量與舌鱗癌患者臨床病理學(xué)特征的關(guān)系