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1、本論文由兩部分組成,第一部分是基于丹參基因組和轉(zhuǎn)錄組發(fā)掘丹參酮生物合成相關(guān)的bHLH轉(zhuǎn)錄因子,第二部分是北纈草離體快速繁殖及不定根培養(yǎng)研究。
第一部分:bHLH轉(zhuǎn)錄因子是一類含有basic helix-loop-helix結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子,參與調(diào)控植物次生代謝產(chǎn)物生物合成的研究備受關(guān)注,但有關(guān)bHLH轉(zhuǎn)錄因子如何調(diào)控丹參酮生物合成的研究還屬空白。本研究首次基于丹參(Salvia miltiorrhizaBunge)全基因組序列
2、并結(jié)合轉(zhuǎn)錄組信息,對(duì)丹參bHLH轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)、差異性表達(dá)等進(jìn)行系統(tǒng)研究。在丹參基因組中預(yù)測(cè)到127條bHLH基因,進(jìn)化樹分析顯示可分為25個(gè)亞家族?;赽HLH轉(zhuǎn)錄因子在根、莖、葉、花、根周皮、根韌皮部、根木質(zhì)部以及茉莉酸甲酯處理的葉片中的差異表達(dá)分析,篩選出了7個(gè)最可能參與調(diào)控丹參酮生物合成的bHLH轉(zhuǎn)錄因子,其中3個(gè)(SmbHLH37、SmbHLH74和SmbHLH92)得到qPCR實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證。丹參酮生物合成相關(guān)基因啟動(dòng)子區(qū)域轉(zhuǎn)錄
3、因子結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)表明97%的基因的啟動(dòng)子區(qū)域含有bHLH轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)E-box。研究結(jié)果為闡釋bHLH轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控丹參酮生物合成分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
第二部分:北纈草(Valeriana fauriei Briq.)為敗醬科纈草屬多年生草本植物,以根莖入藥,具有鎮(zhèn)靜安神、解痙止痛、抗抑郁和抗腫瘤等功效。隨著市場(chǎng)需求量的增加和野生資源的減少,尋求一種新的途徑解決資源問題顯得尤為重要。本研究以北纈草嫩芽為外植體,首次建立纈草屬植
4、物的離體快速繁殖體系,并申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利,申請(qǐng)?zhí)枮?01410482874.5。研究確定最優(yōu)不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1 mg/L6-BA+0.02 mg/L IBA,生根實(shí)驗(yàn)確定最優(yōu)培養(yǎng)基為1/2 MS+0.1 mg/L IBA。北纈草試管苗煉苗、移栽實(shí)驗(yàn)表明其易于成活。北纈草不定根培養(yǎng)研究中,不定根誘導(dǎo)最優(yōu)方式為以葉柄為外植體,培養(yǎng)基為MS+1 mg/L KT+0.2 mg/L NAA,愈傷誘導(dǎo)率100%,34天平均外植體生根數(shù)為4±
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