依達拉奉對膿毒癥大鼠腎損傷的保護作用及機制的研究.pdf

1、第一部分依達拉奉對膿毒癥大鼠急性腎損傷的保護效應(yīng)
　　目的：觀察膿毒癥大鼠腎臟損傷的發(fā)生情況，觀察依達拉奉對膿毒癥大鼠腎功能、炎性介質(zhì)、腎病理學(xué)改變及腎線粒體超微結(jié)構(gòu)等的影響，探討依達拉奉是否對膿毒癥急性腎損傷具有保護作用。
　　方法：采用腹腔注射LPS方法復(fù)制膿毒癥急性腎損傷模型，144只SD大鼠隨機分為正常對照組（control組，n=36）、內(nèi)毒素組(LPS組，n=36)、內(nèi)毒素+依達拉奉組（LPS+EDA組，n=36

2、）、依達拉奉組（EDA組，n=36），各組再分3h、6h、12h三個時間觀測點，每時間點12只大鼠，相應(yīng)時間點殺鼠后留取腎組織和血標(biāo)本，檢測血清肌酐、尿素氮，ELISA法測定血清腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-6、白細胞介素-10，觀察腎組織的病理變化，進行病理評分，電鏡觀察腎臟線粒體超微結(jié)構(gòu)的變化，并行半定量評分。
　　結(jié)果：與對照組相比LPS組大鼠血清肌酐、尿素氮上升，12小時達到高峰(P＜0.05);TNF-α、IL-6明顯升

3、高，3小時達到高峰，第6小時下降(P＜0.05);IL-10第3小時升高，第6小時達到高峰，12小時下降(P＜0.05);病理示明顯腎損傷(P＜0.05);電鏡示線粒體超微結(jié)構(gòu)損傷。EDA+LPS組大鼠各時間點肌酐、尿素氮均低于LPS組(P＜0.05)，各時間點TNF-α、IL-6均低于LPS組(P＜0.05)，但IL-10無明顯差異(P＞0.05)，病理顯示LPS+EDA組大鼠腎損傷減輕，評分低于LPS組(P＜0.05)，電鏡示LPS

4、+EDA組線粒體損傷減輕，12小時組半定量分析具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。EDA組與對照組相比，腎功能、血清炎癥因子、光鏡、電鏡均未見明顯差異。
　　結(jié)論：依達拉奉能改善腎功能，顯著抑制TNF-α、IL-6等炎癥因子，減輕病理學(xué)損傷及線粒體超微結(jié)構(gòu)損傷，對膿毒癥腎損傷具有明顯保護作用。
　　第二部分依達拉奉對膿毒癥大鼠腎線粒體保護作用及機制
　　目的：觀察依達拉奉對膿毒癥大鼠腎線粒體膜電位及氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響，探討

5、依達拉奉治療膿毒癥腎損傷的機制。
　　方法：采用腹腔注射LPS方法復(fù)制膿毒癥急性腎損傷模型，144只SD大鼠隨機分為正常對照組（control組，n=36）、內(nèi)毒素組(LPS組，n=36)、內(nèi)毒素+依達拉奉組（LPS+EDA組，n=36）、依達拉奉組（EDA組，n=36），各組再分3h、6h、12h三個時間觀測點，每時間點各12只大鼠，相應(yīng)時間點殺鼠后留取腎組織并提取線粒體，檢測線粒體膜電位及線粒體內(nèi)T-AOC、SOD、GSH、C

6、AT、MDA、NO、TNOS、iNOS的變化。
　　結(jié)果：與Control組相比，LPS組線粒體膜電位持續(xù)下降(P＜0.05);T-AOC明顯下降(P＜0.05);SOD、CAT活性6、12小時點下降(P＜0.05);GSH、NO含量下降(P＜0.05);MDA含量明顯上升(P＜0.05);T-NOS及iNOS活性上升(P＜0.05)。LPS+EDA組大鼠線粒體膜電位、T-AOC、GSH均高于LPS組(P＜0.05)，SOD、CA

7、T活性6、12小時點高于LPS組(P＜0.05);MDA、T-NOS及iNOS均低于LPS組，NO含量相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。EDA組T-AOC明顯高于Control組(P＜0.05)，余指標(biāo)未見明顯變化(P＞0.05)。
　　結(jié)論：依達拉奉能提高膿毒癥大鼠腎線粒體膜電位，抑制氧化應(yīng)激，保護腎線粒體。
　　第三部分依達拉奉對膿毒癥大鼠腎臟凋亡的影響
　　目的：研究依達拉奉對膿毒癥大鼠腎組織的細胞凋亡、和細胞色

8、素C、caspase-3表達的影響及意義。
　　方法：采用腹腔注射LPS方法復(fù)制膿毒癥急性腎損傷模型，144只SD大鼠隨機分為正常對照組（control組，n=36）、內(nèi)毒素組(LPS組，n=36)、內(nèi)毒素+依達拉奉組（LPS+EDA組，n=36）、依達拉奉組（EDA組，n=36），各組再分3h、6h、12h三個時間觀測點，每時間點各12只大鼠，相應(yīng)時間點殺鼠后留取腎組織行TUNEL染色檢測凋亡細胞，WesternBlot檢測細胞