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文檔簡介
1、種子是被子植物的重要生殖器官。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,種子是作物產(chǎn)量形成的基礎,闡明種子大小調(diào)控的分子機理能夠為作物產(chǎn)量形成的機制提供重要的理論依據(jù)。
脫落酸(ABA)是一種重要的倍半萜類植物激素,在根系發(fā)育、葉片衰老、干旱響應、種子休眠以等生物學過程發(fā)揮著重要作用。但是迄今為止,人們對調(diào)控種子早期發(fā)育的分子機制了解甚少。因此,因此本研究以ABA合成突變體aba2-1為切入點,旨在解析ABA調(diào)控種子早期發(fā)育進而影響種子大小的分子機制。A
2、BA2編碼ABA合成過程中的一個短鏈脫氫酶/還原酶。我們的前期研究顯示,ABA合成突變體aba2-1產(chǎn)生的種子體積增大、百粒重增加、胚胎細胞數(shù)目增加,進一步分析發(fā)現(xiàn)胚發(fā)育遲緩,胚乳細胞化時間延遲。本研究在上述研究的基礎上,對造成突變體表型的分子機制做了詳細研究,種子發(fā)育相關基因SHB1、MINI3、IKU2、AP2和DA1的表達分析表明SHB1、MINI3和IKU2的表達量在突變體中顯著升高,而在過表達植株中顯著降低,其他基因表達差異不
3、明顯。進一步研究發(fā)現(xiàn)外施ABA后SHB1的表達量顯著下降,并且GUS染色分析表明ABA2的表達模式與SHB1的表達模式相似,因此我們推測ABA可能是通過負調(diào)控SHB1的表達來調(diào)節(jié)種子發(fā)育。
ABI5、AREB1、AREB2和ABF3是響應ABA信號的轉錄因子,在ABA信號轉導過程中發(fā)揮重要作用。它們的表達量在aba2-1中均比野生型中低,且ABI5降低最顯著。我們進一步發(fā)現(xiàn)abi5突變體的種子也比野生型對照大,并且在abi5突
4、變體中SHB1基因的表達水平上調(diào),因此我們推測ABA是通過ABI5調(diào)控SHB1的表達。CHIP分析和酵母單雜交實驗均表明ABI5可以結合到SHB1基因的啟動子的兩個獨立區(qū)段上(S3、S5)。而EMSA實驗又進一步證明了ABI5可以直接結合到S3區(qū)段上。這些實驗證據(jù)充分證明了ABA至少部分通過其下游信號轉導的組分ABI5負調(diào)控SHB1的表達。
通過本研究,清楚揭示了ABA調(diào)控種子早期發(fā)育的分子機制。ABA合成基因調(diào)控ABA的積累
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