銀天顆粒的制備及保肝作用研究.pdf

1、背景:
　　 灰氈毛忍冬作為《中國藥典》2010年版一部中山銀花項下收載品種,是歷史悠久的藥食兩用藥材,具有抑菌、抗炎、抗病毒、保肝、抗氧化等作用。秀山縣銀花現(xiàn)有種植面積已達(dá)30萬畝,為當(dāng)?shù)厣絽^(qū)農(nóng)民帶來了良好的經(jīng)濟(jì)效益。為提高其市場附加值和抗風(fēng)險能力,延長產(chǎn)業(yè)鏈,研發(fā)以秀山銀花為主的深加工產(chǎn)品,本項目研制以灰氈毛忍冬為主要原料的中藥保健食品—銀天顆粒。
　　 目的:
　　 研究銀天顆粒的提取工藝、成型工藝、對其質(zhì)

2、量及穩(wěn)定性進(jìn)行考察,并觀察其對小鼠實驗性肝損傷的保護(hù)作用,為將銀天顆粒開發(fā)成為中藥保健食品奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1.提取工藝研究:根據(jù)處方中藥物有效成分的理化性質(zhì),選擇混煎水提法提取,并采用正交實驗設(shè)計方法,以浸膏得率、浸膏的綠原酸含量為指標(biāo),優(yōu)化最佳提取工藝。
　　 2.成型工藝研究:用單因素試驗選擇填充劑、潤濕劑、粘合劑的種類,并初步篩選其用量范圍:采用正交設(shè)計法對單因素試驗結(jié)果進(jìn)行優(yōu)化,以口感、粒

3、度、溶化性等指標(biāo)進(jìn)行綜合考察評價,從而篩選出最佳成型工藝。
　　 3.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性考察:(1)鑒別:采用TLC對處方中的山銀花、梔子、藥材A進(jìn)行定性鑒別。(2)檢查:按照《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅰ制劑通則IC顆粒劑項下的規(guī)定制定相關(guān)檢查項目,包括粒度、水分、溶化性、裝量差異等。(3)含量測定:采用HPLC法對銀天顆粒中的綠原酸和梔子苷的含量進(jìn)行測定,確定其含量限度。(4)穩(wěn)定性考察:通過影響因素試驗及加速試驗考察銀天

4、顆粒的穩(wěn)定性。
　　 4.銀天顆粒對小鼠實驗性肝損傷的保護(hù)作用研究:
　　 (1)對小鼠cch急性肝損傷的保護(hù)作用:選用昆明種小鼠,均分為6組,即正常、模型、聯(lián)苯雙酯和銀天顆粒6.6g·kg-1、13.2g·kg-1、26.4g·kg-1組。連續(xù)灌胃給藥14d天后按20mL·kg-1體重的劑量灌胃給予0.10%CCh橄欖油致小鼠急性肝損傷,禁食不禁水16h后,測定小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(

5、AST)活性,肝勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,并對肝組織進(jìn)行病理切片。
　　 (2)對小鼠急性酒精肝損傷的保護(hù)作用:選用昆明種小鼠,均分為6組,即正常、模型、聯(lián)苯雙酯和銀天顆粒6.6g·kg-1、13.2g·kg-1、26.4g·kg-1組。連續(xù)灌胃給藥14d,每次灌胃給藥2h后,除正常組外按14mL·kg-1體重的劑量灌胃給予灌胃50%乙醇。末次灌胃50%乙醇后,禁食不禁水12h,測定小鼠血清中AL

6、T、AST活性,肝勻漿中SOD活性及丙二醛MDA.含量。
　　 結(jié)果:
　　 1.提取工藝研究:稱取處方量的灰氈毛忍冬、梔子、藥材A,粉碎過40目篩,加15倍量的水,在70℃的溫度下煎煮3次,每次1h。合并濾液,真空干燥得浸膏。其浸膏得率、浸膏中綠原酸含量分別為59.01%、11.18%。
　　 2.成型工藝研究:將濃縮液減壓真空干燥,粉碎成浸膏粉。加入適量的淀粉、糊精、PVP、甜菊糖混勻,濕法制粒,在60℃下干

7、燥45min,整粒,密封包裝。
　　 3.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性考察:參照藥典擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案,包括:(1)鑒別:采用TLC對顆粒劑及處方中的藥材進(jìn)行定性鑒別。(2)檢查:粒度＜15%、水分含量＜6%、溶化性、裝量差異均符合《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅰ制劑通則IC顆粒劑項下的相關(guān)規(guī)定。(3)含量檢測項目以綠原酸計,不得低于10.00mg·g-1(4)穩(wěn)定性考察:通過影響因素試驗考察,得出銀天顆粒在生產(chǎn)、包裝、貯存時應(yīng)注意避免強(qiáng)光

8、長時間照射。參考加速試驗的結(jié)果表明銀天顆粒在加速試驗期間內(nèi),各項指標(biāo)均符合規(guī)定,穩(wěn)定性良好。
　　 4.銀天顆粒對小鼠實驗性肝損傷的保護(hù)作用:
　　 (1)對小鼠CCl4急性肝損傷的保護(hù)作用:與正常組相比,模型組小鼠血清中AST、ALT的活性明顯升高,肝組織中SOD活性降低,MDA含量升高,均具有極顯著差異(P＜0.01),顯示造模成功。與模型對照組相比,銀天顆粒6.6g·kg-1、13.2g·kg-1、26.4.g·k

9、g-1組能顯著降低CCl4急性肝損傷小鼠血清中AST、ALT的活性(P＜0.01)。銀天顆粒13.2g·kg-1、26.4g·kg-1能顯著升高小鼠肝組織中SOD活性(P＜0.01),顯著降低MDA含量(P＜0.01)。實驗結(jié)果表明銀天顆粒對小鼠CCl4急性肝損傷具有保護(hù)作用。
　　 (2)對小鼠急性酒精肝損傷的保護(hù)作用:與正常組相比,模型組小鼠血清中AST、ALT的活性明顯升高,肝組織中SOD活性降低,MDA含量升高,均具有極

10、顯著差異(P＜0.01),顯示造模成功。與模型對照組相比,銀天顆粒6.6g·kg-1、13.2g·kg-1、26.4g·kg-1組能極顯著降低小鼠血清中AST活性(P＜0.01);銀天顆粒13.2g·kg-1、26.4g·kg-1組能顯著降低小鼠血清中ALT活性(P＜0.05或P＜0.01);銀天顆粒13.2g·kg-1、26.4g·kg-1組能顯著升高小鼠肝組織中SOD活性(P＜0.01);銀天顆粒6.6g·kg-1、13.2g·kg

11、-1、26.4g·kg-1組能顯著降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01)。實驗結(jié)果表明銀天顆粒對小鼠急性酒精性肝損傷具有保護(hù)作用。
　　 結(jié)論:
　　 稱取處方量的灰氈毛忍冬、梔子、藥材A,加15倍量的水,70℃煎煮3次,每次1h,提取液濃縮,干燥,粉碎,加入5倍量的填充劑和5%的PVP,混勻,噴灑60%乙醇濕法制粒,干燥,過篩,即得銀天顆粒。按此工藝制備的銀天顆粒質(zhì)量可控,穩(wěn)定性良好。銀天顆粒對小鼠CCl4急性肝