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文檔簡介
1、樟芝是我國臺灣特有的珍稀食(藥)用真菌,生長速度極其緩慢。由于其廣泛的生物活性,引起了國內外研究者的關注。大量研究表明,樟芝具有廣泛的生物活性,如:抗氧化、保肝、抗腫瘤、消炎等。本論文對購買的樟芝菌株進行了活化;以菌絲產量和三萜類化合物產量為主要目標,通過單因素試驗和響應面方法對樟芝搖瓶培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化;在此基礎上,引入物理場(超聲和磁場)對樟芝液態(tài)培養(yǎng)進行作用,旨在促進樟芝液態(tài)發(fā)酵,提高菌絲產量和三萜產量;最后對物理場輔助發(fā)酵后的菌
2、絲進行形態(tài)、結構研究,初步探索超聲和磁場對其作用的機制。
主要研究工作及其結論如下:
(1)樟芝菌的搖瓶培養(yǎng)發(fā)酵:以樟芝菌絲產量和三萜產量為指標,通過單因素試驗初步確定樟芝搖瓶培養(yǎng)最佳實驗條件,在單因素實驗的基礎上,根據SPSS軟件分析結果,選取對影響樟芝菌絲產量和三萜產量影響較好的培養(yǎng)條件,進行了響應面法參數優(yōu)化。得到最佳的培養(yǎng)條件為:玉米粉添加量3.22%、黃豆粉添加量0.36%、搖床轉速140 r/min,驗證
3、實驗結果為:菌絲產量6.68 g/L、三萜產量0.25g/L。
(2)樟芝菌的超聲輔助液體發(fā)酵:研究了適合樟芝液態(tài)培養(yǎng)的超聲波頻率、超聲強度、處理時間、作用階段,在此基礎上初步探索超聲對樟芝液體培養(yǎng)影響的作用機制。試驗獲得樟芝超聲輔助液態(tài)培養(yǎng)最佳參數為:超聲作用時間點48 h,超聲功率60 W/L,超聲頻率68 kHz,超聲處理總時間15 min。在最佳培養(yǎng)條件下,菌絲產量為7.78 g/L,三萜產量為0.32 g/L,與對照
4、組相比,分別提高了17.52%和39.13%。掃描電鏡和透射電鏡觀察結果表明,與常規(guī)發(fā)酵獲得的樟芝菌絲體相比,超聲波對樟芝菌絲表面微觀結構和細胞內部結構影響較大。對兩種方法培養(yǎng)的樟芝菌絲體二萜物質進行傅立葉紅外光譜檢測,發(fā)現兩種方式產出的三萜化合物成分無明顯差別。
(3)樟芝菌的磁場輔助液體發(fā)酵:通過研究磁場對樟芝菌絲產量以及菌絲三萜產量的影響,初步探討了磁場促進樟芝液態(tài)發(fā)酵的規(guī)律。磁場強度為60 mT時,磁場對樟芝菌絲的生長
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