類(lèi)胡蘿卜素對(duì)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的：分析β-胡蘿卜素、臧紅素、視黃酸、角黃素和巖藻黃質(zhì)等類(lèi)胡蘿卜素作為P-gp底物的可行性，并探討類(lèi)胡蘿卜多耐藥和敏感細(xì)胞MDR的影響。
　　方法：采用熒光底物Rho123、鈣綠黃素及多柔比星孵育細(xì)胞檢測(cè)類(lèi)胡蘿卜素對(duì)Caco-2細(xì)胞MDR的影響。MTT檢測(cè)類(lèi)胡蘿卜素和化療藥物聯(lián)合使用的細(xì)胞毒性。藥物的聯(lián)合作用效果采用聯(lián)合指數(shù)分析、等效應(yīng)圖及中效公式評(píng)價(jià)。Real timeRT-PCR was carried out to qua

2、ntify the mRNA level of MDR1 in Caco-2 aftertreatment for48 h with40μM of selected carotenoids.實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)40μM類(lèi)胡蘿卜素干預(yù)后Caco-2細(xì)胞MRD1 mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：類(lèi)胡蘿卜素以劑量依賴(lài)性放肆增加這些P-gp底物在細(xì)胞中的聚集，這表明類(lèi)胡蘿卜素也可以作為P-gp底物發(fā)揮作用。與已知競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑維拉帕米相比

3、，巖藻黃質(zhì)和角黃素(50-100M)能夠引起3-5倍高熒光探針在細(xì)胞中聚集。類(lèi)胡蘿卜素表現(xiàn)出較低的細(xì)胞毒性及MDR，其IC50在100-200μM之間。類(lèi)胡蘿卜素和八種結(jié)構(gòu)不同的細(xì)胞毒性制劑對(duì)Caco-2細(xì)胞的細(xì)胞毒性具有協(xié)同促進(jìn)作用，這可能通過(guò)抑制ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子功能實(shí)現(xiàn)。例如，巖藻黃質(zhì)協(xié)同增加5-FU的細(xì)胞毒性53.37倍，長(zhǎng)春堿的細(xì)胞毒性為51.01倍，依托泊苷的毒性12.47倍等。RT-PCR結(jié)果表明，相對(duì)于對(duì)照組而言，巖藻黃質(zhì)和角