神經(jīng)干細(xì)胞移植治療大鼠糖尿病神經(jīng)原性膀胱的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
　　研究神經(jīng)干細(xì)胞移植修復(fù)大鼠糖尿病神經(jīng)原性膀胱功能的效果,為進(jìn)一步探討其可能機(jī)制提供基礎(chǔ)。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　1.從新生鼠海馬組織分離培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,觀察神經(jīng)干細(xì)胞及其傳代細(xì)胞的形態(tài)、生長特點(diǎn),并通過免疫細(xì)胞化學(xué)染色以及熒光顯微鏡等鑒定神經(jīng)干細(xì)胞及其誘導(dǎo)分化情況。
　　2.一次性腹腔注射60mg/kgSTZ制備大鼠糖尿病神經(jīng)原性膀胱模型,觀察大鼠體重及空腹尾靜脈血糖變化,8周后檢測其尿流率、尿流曲

2、線等尿流動(dòng)力學(xué)參數(shù)改變情況,病理切片觀察其膀胱病理改變情況。
　　3.腹腔內(nèi)注射胰島素控制模型大鼠血糖,平穩(wěn)后,將模型大鼠再隨機(jī)分為2組:分別通過股靜脈注射、膀胱肌肉注射移植神經(jīng)干細(xì)胞,8周后通過尿流動(dòng)力學(xué)、膀胱神經(jīng)電生理及免疫組化比較其與陽性對照組膀胱功能改善及膀胱組織MAP-2、GFAP陽性表達(dá)情況。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　1.從新生鼠海馬組織分離培養(yǎng)出的神經(jīng)球,呈懸浮生長,Nestin陽性;誘導(dǎo)后大量細(xì)胞從神經(jīng)球中

3、遷出,可得到MAP-2陽性的神經(jīng)元細(xì)胞、GFAP陽性的星形膠質(zhì)細(xì)胞。
　　2.注射STZ后大鼠出現(xiàn)煩渴多飲、易激惹、多食、多尿等典型糖尿病癥狀,體重明顯減輕,空腹尾靜脈血糖明顯升高,均≥16.9mol/L。尿流動(dòng)力學(xué)檢測示最大膀胱容量增大,最大膀胱內(nèi)壓降低,殘余尿增多,膀胱順應(yīng)性增高;尿流動(dòng)力學(xué)曲線圖顯示需依靠腹壓完成膀胱排尿,逼尿肌收縮力弱;膀胱HE染色示膀胱逼尿肌纖維排列紊亂,肌細(xì)胞肥大,形態(tài)各不相同。
　　3.血糖平穩(wěn)

4、后,NSCs通過膀胱肌肉注射移植后,大鼠糖尿病神經(jīng)原性膀胱的尿流動(dòng)力學(xué)參數(shù)比陽性對照組有一定改善(P<0.05),膀胱神經(jīng)電生理示神經(jīng)傳導(dǎo)有所恢復(fù)。而股靜脈注射組與陽性對照組相比較,膀胱神經(jīng)傳導(dǎo)及膀胱排尿功能均無改善(P>0.05)。膀胱免疫組化染色示膀胱肌肉注射移植NSCs后,其MAP-2、GFAP陽性表達(dá)增加。
　　結(jié)論:
　　1.新生鼠海馬組織可分離培養(yǎng)出豐富的NSCs。
　　2.NSCs能在體外大量增殖并穩(wěn)定傳