華法林和阿司匹林吸收和分布相互作用的研究.pdf

1、華法林和阿司匹林分別是抗凝和抗血小板治療的一線藥物。臨床上很多患者既有動脈血栓形成的風險，又有靜脈或心腔內血栓形成的風險，單一抗凝或抗血小板藥物均只能充分抑制其中一種類型血栓形成風險，常需要華法林和阿司匹林的聯(lián)合療法。國外臨床聯(lián)用普遍，在北美有超過100萬患者在同時接受華法林和阿司匹林的治療。但這種聯(lián)合療法的最大問題是出血風險會顯著增加。盡管兩藥聯(lián)用廣泛，但聯(lián)用證據匱乏，療效和安全性評價在國際臨床和學術界有很大爭議，國內外各類臨床實踐指

2、南均未明確說明，醫(yī)生也常困惑于是否應該以及在何種情況下對這兩種藥進行聯(lián)用。對于兩藥聯(lián)用利弊的證據，目前國外僅有部分臨床試驗，沒有基礎研究，具體的作用機制和環(huán)節(jié)尙不清楚。
　　本研究的目的在于應用在體和體外法定量研究華法林和阿司匹林在吸收和分布環(huán)節(jié)的相互作用機制，為臨床兩藥合理聯(lián)用提供依據。本研究分為以下三部分：
　　1.華法林與阿司匹林在體腸吸收的相互作用研究
　　建立大鼠在體分腸段單向腸灌流模型，應用重量法校正灌流液

3、體積，并采用HPLC測定灌流液中華法林對映體、阿司匹林的濃度，分別計算其吸收速率常數(Ka)和表觀吸收系數(Papp)，定量比較單用組、聯(lián)用組和誘導組中R-華法林、S-華法林和阿司匹林的腸吸收差異。結果顯示，與單用華法林組相比，合用阿司匹林組中R-和S-華法林的吸收無明顯變化(P＞0.05)，阿司匹林誘導組中R-和S-華法林在十二指腸和空腸段的吸收顯著降低(P＜0.05)；與單用阿司匹林相比，合用華法林組和華法林誘導組中阿司匹林在各腸段

4、的吸收均無明顯變化(P＞0.05)。提示，長期使用阿司匹林對華法林對映體在十二指腸和空腸段的吸收有抑制作用，且不存在立體選擇性，而華法林對阿司匹林的吸收影響不明顯。
　　2.華法林與阿司匹林在MDCK細胞跨膜轉運模型上的轉運相互作用研究
　　建立MDCK細胞單層跨膜轉運模型，采用MTT法篩選出華法林和阿司匹林聯(lián)用的安全濃度，定量考察華法林、阿司匹林單用和兩藥相互聯(lián)用后，R-華法林、S-華法林和阿司匹林吸收轉運的差異，采用HP

5、LC測定華法林對映體和阿司匹林的濃度，計算表觀滲透系數（Papp）。結果顯示，使用高濃度阿司匹林（200mg/L和300mg/L）能明顯降低R-和S-華法在MDCK細胞A→B的轉運量，但僅在120min或90min變化才顯著，且能顯著降低其吸收滲透系數，同時分泌滲透系數有升高趨勢；華法林聯(lián)用阿司匹林后，阿司匹林的轉運量和滲透系數均無明顯變化。提示，長時間使用高濃度的阿司匹林能限制R-和S-華法林的吸收，無立體選擇性，可能與阿司匹林能誘導

6、腸道細胞MDR1的表達有關，華法林對阿司匹林的吸收無影響。
　　3.熒光光譜法研究華法林和阿司匹林與血清白蛋白的相互作用
　　在模擬生理條件下，利用熒光光譜法考察華法林和阿司匹林同時與人血清白蛋白的相互作用。通過 Stern-Volmer方程考察猝滅機制，計算結合常數（KA）和結合位點（n）。結果顯示，華法林或阿司匹林對HSA的內源性熒光均因形成復合物而產生靜態(tài)猝滅，n接近1。310K時，WAR-HSA、WAR-ASA-HS

7、A體系的KA分別為3.50×104、1.20×104 L·mol-1，WAR-ASA-HSA體系與WAR-HSA的KA之比為0.34；ASA–HSA、ASA-WAR-HSA體系的KA分別為2.37×103、1.14×103 L·mol-1，ASA-WAR-HSA體系與ASA–HSA的KA之比分別為0.48。提示，華法林與阿司匹林共存時可發(fā)生相互作用，其中一種藥物的存在會使另外一種藥物與HSA的KA降低，結合穩(wěn)定性減弱，從而使得該藥物的游