毛細(xì)管電泳法評(píng)價(jià)細(xì)胞和小分子的親和相互作用.pdf

1、毛細(xì)管電泳（CE）在評(píng)價(jià)物質(zhì)間的親和相互作用方面已有廣泛的應(yīng)用。主要電泳模式包括親和毛細(xì)管電泳法（ACE）、部分填充親和毛細(xì)管電泳法（PFACE）及前沿分析毛細(xì)管電泳法（FACE）等，研究對(duì)象主要包括核酸、蛋白質(zhì)及多糖等生物大分子與藥物小分子的相互作用。細(xì)胞作為基本生命單元，具有特殊的結(jié)構(gòu)及功能，在藥物吸收、分布及代謝方面發(fā)揮著重要作用。因此，研究細(xì)胞與小分子的親和相互作用具有重要意義。本文優(yōu)化建立幾種CE方法用于研究細(xì)胞與小分子的相互

2、作用，包括中藥延胡索提取物的在線抗血小板聚集活性評(píng)價(jià)，具有抗血小板活性的酚酸類小分子化合物與血小板的相互作用，以及具有抗炎活性的苷類小分子化合物與巨噬細(xì)胞的相互作用。
　　第一部分為緒論部分，綜述了研究親和作用的意義、對(duì)象及方法，其中親和毛細(xì)管電泳廣泛用于物質(zhì)間結(jié)合常數(shù)的測(cè)定，并已發(fā)展有多種親和電泳模式用于評(píng)價(jià)不同體系。對(duì)血小板及巨噬細(xì)胞的生理、病理作用亦進(jìn)行了簡(jiǎn)要的概述。
　　第二部分建立了一種在線測(cè)定血小板聚集率的 CE

3、新方法并用于評(píng)價(jià)藥物的抗血小板聚集活性。在闡明CE測(cè)定血小板聚集原理的基礎(chǔ)上，推導(dǎo)出CE測(cè)定藥物抗血小板聚集活性的計(jì)算公式。分別用CE及比濁法測(cè)定了中藥延胡索提取物的抗血小板聚集活性，比較兩種方法在樣品消耗、測(cè)定結(jié)果及測(cè)定原理方面的區(qū)別。
　　第三部建立了血小板功能化的 OT-ACEC方法用于評(píng)價(jià)血小板與小分子化合物的親和相互作用，成功評(píng)價(jià)丹酚酸B等小分子化合物與血小板的親和相互作用。同時(shí)用比濁法測(cè)定了這些小分子化合物體外抗ADP

4、、AA及THR誘導(dǎo)的血小板聚集活性，分析小分子化合物的抗血小板聚集活性與小分子-血小板親和相互作用之間的關(guān)系。
　　第四部分采用ACE、PFACE及FACE三種電泳模式評(píng)價(jià)了巨噬細(xì)胞與柚皮苷等小分子化合物的親和相互作用。其中，PFACE模式定性評(píng)價(jià)了巨噬細(xì)胞和小分子化合物的親和相互作用，F(xiàn) AC E利用細(xì)胞的嗜線性測(cè)定了巨噬細(xì)胞和小分子的結(jié)合常數(shù)。此外，將巨噬細(xì)胞作為假固定相用于檸檬提取物中潛在活性成分的分析中。
　　第五部