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文檔簡介
1、目的:通過研究姬松茸菌孢多糖對正常小鼠免疫功能和對人胃癌SGC-7901細胞移植裸鼠瘤p53和Bcl-2基因表達的影響,來探討姬松茸菌孢多糖對實驗性胃癌防治作用及免疫機理,為研制新型防治胃癌藥物奠定基礎。 方法:以YAC-Ⅰ細胞和P-815細胞作為靶細胞,采用MTT比色法測定NK細胞和LAK細胞活性,來研究姬松茸菌孢多糖對正常Balb/c小鼠免疫功能的影響。 將體外培養(yǎng)的人胃癌SGC-7901細胞接種于BALB/C-nu
2、/nu裸鼠的皮下,建立人胃癌移植瘤模型,共30只,隨機分為5組:香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組、陰性對照組。采用灌胃的方法進行藥物干預,共21天,各實驗組每隔3-4d用游標卡尺測量并計算移植瘤的體積,繪制移植瘤生長曲線;于末次給藥24h后,脫臼處死小鼠,切取移植瘤并用電子分析天平稱重,計算藥物的抑瘤率,以觀察各組的抑瘤效果,同時按組別固定瘤塊;采用免疫組織化學方法檢測人胃癌SGC-7901細胞移植裸鼠瘤p53和Bcl-2基因
3、表達水平。 結果:在測定NK細胞活性實驗中,結果顯示:(1)香菇多糖組,姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與陰性對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01);(2)姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組之間互相比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(3)姬松茸菌孢多糖大、小劑量組與香菇多糖組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 在測定LAK細胞活性實驗中,結果顯示:(1)與陰性對照組比較香菇多糖組,姬松茸菌孢多糖大、中劑量組差
4、異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),姬松茸菌孢多糖小劑量組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);(2)姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與香菇多糖組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 在抑瘤實驗中結果顯示:(1)通過裸鼠瘤體積生長曲線可見,陰性對照組瘤體增長較快,而姬松茸菌孢多糖中、小劑量組和香菇多糖組瘤體增長較為緩慢,姬松茸菌孢多糖大劑量組瘤體增長最為緩慢;(2)將第22天各藥物組裸鼠移植瘤體積與陰性對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<
5、0.001);與香菇多糖組比較,姬松茸菌孢多糖大劑量組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),姬松茸菌孢多糖中、小劑量組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);(3)以瘤重計算各藥物組相對陰性對照組的抑瘤率,香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組分別為38.38%、53.75%、39.01%、32.23%;(4)以脾重計算脾臟指數與陰性對照組比較,香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中劑量組差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),姬松茸菌孢多糖小劑量組差
6、異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與香菇多糖組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 人胃癌SGC-7901細胞移植裸鼠瘤p53基因表達水平的實驗結果顯示:(1)香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與陰性對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.001);(2)與香菇多糖組比較,姬松茸菌孢多糖大、小劑量組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001),姬松茸菌孢多糖中劑量組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
7、 人胃癌SGC-7901細胞移植裸鼠瘤Bcl-2基因表達水平的實驗結果顯示:(1)香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與陰性對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01);(2)與香菇多糖組比較,姬松茸菌孢多糖大劑量組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001),姬松茸菌孢多糖中、小劑量組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結論:姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組對NK、LAK細胞的活性都有不同程度的提高,且對NK細胞活性的提高與劑
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