Menin調(diào)控肝癌細(xì)胞表型的組蛋白甲基化特性探討.pdf

1、原發(fā)性肝癌是臨床上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,據(jù)統(tǒng)計(jì),在中國(guó)每年新發(fā)肝癌患者約三十六萬(wàn),居惡性腫瘤的第二位。由于肝癌的發(fā)生是一個(gè)多因素、多途徑協(xié)同作用的復(fù)雜過(guò)程,因此,至今仍缺乏對(duì)其有效的治療及分子機(jī)制的認(rèn)識(shí)。多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤1型(MEN1)是一種家族遺傳性的腫瘤綜合征,能夠在多種內(nèi)分泌器官中發(fā)生腫瘤。MEN1編碼新生蛋白menin,在許多胚胎及成年組織中表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn),將小鼠體內(nèi)Menl基因敲除,可導(dǎo)致胚胎11.5-13.5天的致死性,并且

2、,肝臟組織中的上皮、造血細(xì)胞凋亡增加。胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF2)是有67個(gè)氨基酸的多肽。在人體內(nèi),IGF2為調(diào)節(jié)胚胎生長(zhǎng)發(fā)育所必需的生長(zhǎng)因子。肝臟發(fā)育過(guò)程中IGF2基因以啟動(dòng)子、甲基化程度、印跡狀態(tài)等進(jìn)行動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)。在肝組織中的異常表達(dá)可能與肝細(xì)胞的癌變轉(zhuǎn)化和肝癌細(xì)胞的自分泌、旁分泌調(diào)解機(jī)制有關(guān)。
　　 本研究利用臨床肝癌病理標(biāo)本免疫組織化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在腫瘤中menin的表達(dá)量明顯高于癌旁組織,menin高表達(dá)肝癌患者AFP的表

3、達(dá)量明顯高于menin表達(dá)無(wú)差異患者,提示menin與肝癌可能密切相關(guān)。在分子水平,以Hep G2和HL,-7702細(xì)胞為研究模型,通過(guò)染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)、real-timePCR等實(shí)驗(yàn)技術(shù)探討了menin在肝癌發(fā)生過(guò)程中的作用及其分子機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn),menin能夠促進(jìn)肝癌及正常肝細(xì)胞的增殖,并且,menin也能夠促進(jìn)裸鼠荷瘤模型的腫瘤生長(zhǎng),在DEN誘導(dǎo)的小鼠肝損傷模型中menin表達(dá)量上調(diào),表明,menin在肝癌發(fā)生過(guò)程中扮

4、演著促癌基因的角色。進(jìn)一步通過(guò)cDNA microarray及ChIP-on-chip等分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn),menin結(jié)合在Yap1、IGF2及各型膠原蛋白等與肝細(xì)胞功能調(diào)控密切相關(guān)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄、生長(zhǎng)因子啟動(dòng)子位點(diǎn)。ChIP結(jié)果顯示,menin結(jié)合在IGF2啟動(dòng)子區(qū),通過(guò)招募MLL、Dot1L等關(guān)鍵的組蛋白修飾酶上調(diào)IGF2啟動(dòng)子區(qū)的H3K4、H3K79組蛋白修飾,進(jìn)而上調(diào)IGF2的表達(dá)。
　　 本研究從細(xì)胞生物學(xué)及組學(xué)角度探討了