川西高原貢嘎山區(qū)土壤纖維素降解菌的分離與篩選.pdf

1、纖維素作為植物細(xì)胞壁的主要成分，是地球上最豐富的生物質(zhì)類可再生資源。我國是農(nóng)業(yè)大國，每年在農(nóng)作物生產(chǎn)活動中產(chǎn)生的包括秸稈、棉籽殼、木屑等農(nóng)業(yè)廢棄物的量十分巨大。分離并篩選出能夠高效利用纖維素的纖維素降解菌是提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中纖維素物質(zhì)轉(zhuǎn)化率的關(guān)鍵所在。本研究旨在分離、純化并篩選出能夠高效利用纖維素的纖維素降解菌株，并經(jīng)過一系列實驗探究出所分離出的菌株在秸稈降解過程中的最佳組合方式，以期應(yīng)用到實際生產(chǎn)環(huán)節(jié)中。主要研究結(jié)果如下:
　　1.

2、本研究采用選擇性培養(yǎng)基從川西甘孜州高海拔區(qū)林下森林土壤中，共獲得79株以纖維素物質(zhì)作為其唯一碳源的菌株。
　　2.從79株菌中篩選出了15株能在剛果紅平板上形成明顯水解圈的菌株，根據(jù)形態(tài)學(xué)鑒定表明，細(xì)菌4株、放線菌11株。以DNS法測試并計算了這15株菌株的纖維素酶活性，結(jié)果顯示菌株112、110、174、154和146表現(xiàn)出較高的產(chǎn)纖維素酶能力，其CMC酶活性分別達(dá)到了78.13 U、75.05 U、71.75 U、70.65

3、U和65.15 U。
　　3.15株供試菌株間拮抗試驗結(jié)果表明，大部分細(xì)菌之間與放線菌之間無明顯拮抗作用，如菌株112、146、171、174之間無拮抗;部分菌株具有較強的拮抗性，如細(xì)菌110不能與146、147、154、171共存。該結(jié)果為混合菌群組合方式提供了參考。
　　4.以玉米秸稈為底物，研究了單菌株與混合菌群對玉米秸稈的降解能力。結(jié)果表明，單菌株110、116、145、150、153、154、174和179在玉米秸

4、稈降解過程中的酶活水平相對較高，其中154接種9d后的酶活為所有單菌株中最高，達(dá)到48.90 U;混合菌群組合A(110、116、174)和F(A+B)的纖維素酶活最高分別達(dá)到了47.74U和57.03 U，而組合F(A+B)對玉米秸稈降解酶活高于所有單菌株。
　　5.通過分子生物學(xué)手段確定混合菌群組合F各單菌株110、116、174、147、154、171的分類地位，其中菌株110為類芽孢桿菌（Paenibacillus pab