基質輔助激光解吸電離質譜掃描生物組織切片成像方法的建立及應用.pdf

1、建立了基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)直接掃描生物組織切片獲得切片中組分分布圖的方法?？疾炝诵迈r組織貯存，冰凍切片的方法；探討了基質種類、濃度、覆蓋方法，研發(fā)了基質噴霧專用裝置和方法，優(yōu)化了質譜信號全自動掃描參數(shù)：15mg/mL SA逐步噴霧法、15μm切片厚度、200μm點陣間距、30％～50％激光能量和200次信號累加；優(yōu)化了原始信號全自動處理參數(shù)和質譜峰統(tǒng)計參數(shù)。自編軟件補充了商用軟件所缺少的“組織切

2、片質譜平均譜以及譜峰命中次數(shù)Hits值分布統(tǒng)計”兩個重要功能。結果表明，Hits值越大，組分分布越廣。通過對照品的質譜成像分析，證實了本方法的組分分布圖像的定位是準確的。本文共獲得250余張切片的4萬多張質譜圖。該方法穩(wěn)定可行，重復性優(yōu)于80％。 分析了SD大鼠的肺水腫組織(16例)和正常肺組織(15例)，采用t-檢驗(P<0.05)篩選出12個差異分子，其中，3個上調，9個下調，而且上調、下調的分子與其分子量密切相關，這在其他

3、組織的相關研究中未觀察到，可能是肺水腫疾病特有的。根據(jù)這12個差異分子建立分類預測模型，對11個混合樣例進行盲篩，準確率達到91％(10/11)。 還分析了人胃腸間質瘤組織(12例)和正常組織(12例)，采用t-檢驗統(tǒng)計學方法，篩選出16個具有統(tǒng)計學意義的差異分子(P<0.05)，其中，9個上調，7個下調。根據(jù)這16個差異分子建立分類預測模型，對8個混合樣例進行盲篩，準確率達到100％。 另外，本文還統(tǒng)計了肝臟、肺水腫組