大豆黃酮、Mung、Gin和L08對人肝癌細(xì)胞的抑制作用.pdf

1、目的：
　　肝癌(Liver cancer)是指發(fā)生在肝臟的惡性腫瘤，包括原發(fā)性肝癌與轉(zhuǎn)移性肝癌，其發(fā)病率與死亡率較高，嚴(yán)重威脅著人類的生命健康。治療肝癌的傳統(tǒng)方法也是主要的治療方法就是手術(shù)切除、放射治療、化學(xué)抗腫瘤藥物治療。然而傳統(tǒng)的治療方法效果并不理想，肝癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移難以控制。近年來，人們對天然植物的抗腫瘤作用的研究越來越多。本實(shí)驗(yàn)從大豆、綠豆和生姜中分別提取分離出大豆黃酮、Mung、Gin和L08，用這四種藥物處理體外培養(yǎng)

2、的肝癌細(xì)胞SMMC-7721，來研究它們對肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增殖及對肝癌干細(xì)胞CD44表達(dá)水平的影響，從而希望為肝癌的防治提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721，獲得對數(shù)生長期細(xì)胞。
　　2.配制100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml、400μg/ml和500μg/ml濃度的大豆黃酮、Mung、Gin和L08，分別處理對數(shù)生長期的人肝癌細(xì)胞SMMC-7721，處

3、理24小時(shí)、48小時(shí)和72小時(shí)，然后用MTT法測定細(xì)胞的增殖率并繪制細(xì)胞生長曲線。
　　3.配制100μg/ml、300μg/ml、和500μg/ml的大豆黃酮、Mung、Gin和L08分別處理人肝癌細(xì)胞SMMC-7721，處理時(shí)間為24h。將熒光素FITC標(biāo)記的抗體與處理過的細(xì)胞混合通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原CD44。
　　4.配制100μg/ml、300μg/ml、和500μg/ml的大豆黃酮、Mung、Gin和L0

4、8分別處理人肝癌細(xì)胞SMMC-7721，并用WesternBlot方法測定肝癌干細(xì)胞中CD44蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.MTT結(jié)果顯示:大豆黃酮、Mung、Gin和L08在不同的藥物濃度和給藥時(shí)間內(nèi)對人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增值均有抑制作用，且濃度和抑制作用密切相關(guān)。
　　2.流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:大豆黃酮、Mung、Gin和L08處理人肝癌細(xì)胞SMMC-772124h后，CD44陽性細(xì)胞數(shù)目均少于未給

5、藥對照組。
　　3.WesternBlot結(jié)果顯示:大豆黃酮、Mung和L08處理人肝癌細(xì)胞SMMC-7721后CD44蛋白表達(dá)水平均有降低，且劑量與表達(dá)水平相關(guān)。但Gin不能降低人肝癌干細(xì)胞SMMC-7721中CD44的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.大豆黃酮、Mung、Gin和L08均能抑制人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增殖，并且抑制作用與濃度密切相關(guān)。
　　2.大豆黃酮、Mung、Gin和L08均能抑制人肝癌細(xì)