肺腺癌多藥耐藥細(xì)胞系A(chǔ)549-ADM的建立及阿奇霉素耐藥逆轉(zhuǎn)研究.pdf

1、目的：用阿霉素體外誘導(dǎo)的方法建立多藥耐藥細(xì)胞系A(chǔ)549/ADM。研究阿奇霉素對(duì)A549/ADM的耐藥逆轉(zhuǎn)作用。 方法：采用阿霉素誘導(dǎo)A549使其耐藥。首先在培養(yǎng)液中使用低濃度阿霉素持續(xù)誘導(dǎo)，再逐漸、間歇增加阿霉素濃度。用流式細(xì)胞儀(FCM)測(cè)定A549和A549/ADM的P-GP和MRP的表達(dá)。用MTT法分別檢測(cè)四種藥物對(duì)A549、A549/ADM、使用阿奇霉素(AZM)處理后的A549/ADM的半數(shù)抑制濃度(IC50)。MTT

2、法檢測(cè)不同濃度阿奇霉素對(duì)A549/ADM的抑制率。用FCM檢測(cè)A549、A549/ADM及使用阿奇霉素處理的A549/ADM細(xì)胞內(nèi)ADM熒光強(qiáng)度。 結(jié)果：A549的P-GP和MRP的表達(dá)分別為2.3％和2.5％，而A549/ADM的P-GP和MRP的表達(dá)分別為33％和46.3％。A549/ADM對(duì)阿霉素的耐藥指數(shù)為A549的17.80倍，對(duì)VCR、DDP、MTX均有不同程度的耐藥。使用5μg/ml阿奇霉素處理后，A549/ADM

3、對(duì)ADM的敏感性為原來的2.81倍，對(duì)DDP、VCR、MTX的敏感度分別為原來的1.86、3.78、3.86倍。加入10μg/ml的阿奇霉素后，A549/ADM對(duì)上述藥物的敏感程度提高更明顯。同樣濃度的阿霉素作用相同時(shí)間后，A549、A549/ADM和使用阿奇霉素處理后的A549/ADM的熒光強(qiáng)度分別為121.4、51.2、96。 結(jié)論：利用阿霉素在體外采用低濃度梯度持續(xù)誘導(dǎo)，加以高濃度間歇誘導(dǎo)的方法，可以建立多藥耐藥細(xì)胞系。耐