氨基熒光素及其衍生物的合成與表征.pdf

1、氨基熒光素是熒光素類染料中重要的熒光探針之一,其活性氨基基團(tuán)能與生物分子中羧基相結(jié)合,結(jié)合后熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng),因而廣泛的應(yīng)用于蛋白質(zhì)分析和免疫學(xué)研究. 本文以4-硝基鄰苯二甲酸,間苯二酚為原料在ZnCl<,2>催化下通過(guò)縮合、還原,在6﹪鹽酸中重結(jié)晶分離制備了5-氨基熒光素和6-氨基熒光素.該方法與傳統(tǒng)5-氨基熒光素制備方法相比較,反應(yīng)步驟縮短,5-氨基熒光素的總收率由18﹪提高至40﹪. 5-氨基熒光素雖能與羧基反應(yīng),

2、但是由于其氨基與芳基相連,大大降低其衍生化的能力,且其為水溶性熒光染料,親脂性差,限制了其在生物分析中的應(yīng)用.為改善其熒光性能,提高氨基的反應(yīng)能力,我們又設(shè)計(jì)合成一系列5-氨基熒光素的衍生物.分別以5-氨基熒光素和2',7'-二氯氨基熒光素為原料進(jìn)行異硫氰酸化制備了5-異硫氰酸酯熒光素和2',7'-二氯異硫氰酸酯熒光素；通過(guò)酰化制備了5-(2-氯乙酰胺基)熒光素以及5-丁二酰亞胺基熒光素；與三聚氯氰反應(yīng)制備了5-[2-(4,6-二氯三嗪

3、基)氨基]熒光素:所得衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)由IP,MS,NMR確證,并測(cè)定了衍生物的熒光性能,發(fā)現(xiàn)所合成的氨基熒光素衍生物與5-氨基熒光素相比其熒光強(qiáng)度、最大激發(fā)波長(zhǎng)和最大吸收波長(zhǎng)均有明顯變化,顯示了較優(yōu)越的熒光性能. 多芳環(huán)氧鎓鹽本身也是無(wú)機(jī)離子顯色和熒光分析的具有較高靈敏度的熒光探針.本文制備了一系列帶有不同取代基團(tuán)的吡喃鎓鹽,使之與5-氨基熒光素反應(yīng),得到了雙發(fā)色團(tuán)熒光染料1-(5-熒光素)吡啶鎓鹽,其中1-(5-熒光素).2