La3+、Ce4+及其殼寡糖配合物對刺參生長、非特異性免疫和抗病力的影響.pdf

1、近年，刺參快速擴(kuò)大化和集約化的養(yǎng)殖導(dǎo)致了刺參感染性疾病爆發(fā)，然而抗生素的使用會帶來刺參抗藥性、藥物殘留、污染環(huán)境等問題。本論文探究了La3+、Ce4+及其殼寡糖配合物對刺參生長和免疫的潛在作用。主要研究內(nèi)容如下:
　　1.在基礎(chǔ)飼料（粗蛋白18.6％，粗脂肪1.1％）中添加La(NO3)3，分別制成含有0、10、25、50和75 mg/kg La3+的飼料，然后飼喂初始體重為6.72±0.01 g的刺參8周，研究La(NO3)3對

2、刺參生長、免疫和抗病力的影響。試驗分5個處理組，每組設(shè)4個重復(fù)，每天17:00飽食投喂一次，次日8:00清理殘餌糞便，試驗期間保持海水溫度16±0.5℃，pH7.8-8.2，鹽度30-31‰，溶氧≥5 mg/L，氨氮≤0.5 mg/L，亞硝態(tài)氮≤1 mgL。研究結(jié)果表明隨著飼料中La3+含量從0增加到50 mg/kg，刺參的特定生長率(SGR)從0.9增加到1.24％/d(P＜0.05)，但是隨著La3+含量繼續(xù)增加SGR下降到0.99

3、％/d。刺參體腔液的吞噬活性和呼吸爆發(fā)活性的結(jié)果與刺參SGR呈現(xiàn)相同的趨勢(P＜0.05)。在La3+添加量為50mg/kg時，刺參體腔液細(xì)胞的超氧化物歧化酶(T-SOD)、酸性磷酸酶(ACP)和堿性磷酸酶(AKP)均達(dá)到最高(P＜0.05)。同時攻毒試驗結(jié)果也表明，刺參在注射燦爛弧菌后，50 mg/kg La3+組的刺參累計發(fā)病率最低(36.54％)(P＜0.05)。因此，刺參飼料中添加50 mg/kg La3+，能夠顯著提高刺參的生

4、長和抗病能力。
　　2.利用鑭(La)可以和殼寡糖配位，制備La3+含量為8.82％的殼寡糖鑭配合物(COS-La)。按照飼料配方制備含有0、150、300、600和1200 mg/kg COS-La的實驗飼料，飼喂6.72±0.01g的刺參8周后，測定生長、免疫和抗病力等指標(biāo)。研究結(jié)果表明添加300和600 mg/kg COS-La可以顯著促進(jìn)刺參生長（0.9-1.2％/d）(P＜0.05)，但是更高劑量的COS-La對刺參生長

5、起到抑制作用(0.88％/d)。300和600 mg/kg COS-La組刺參體腔液的吞噬活性和呼吸爆發(fā)活性也顯著高于其它組(P＜0.05)。體腔液細(xì)胞的T-SOD、ACP和AKP活性均在600 mg/kg COS-La時達(dá)到最高(P＜0.05)，在300 mg/kg時，免疫酶活性也顯著高于空白組(P＜0.05)。攻毒試驗結(jié)果，300和600 mg/kg組刺參累計發(fā)病率顯著低于其它各組(41.03％，38.46％)(P＜0.05)。對比

6、第一章結(jié)果，300 mg/kg COS-La中La3+的含量為26.46mg/kg，300 mg/kg COS-La組的ACP和AKP活性均高于25 mg/kg La3+組，同時300 mg/kg COS-La組的累計發(fā)病率(41.03％)低于25 mg/kg La3+組(53.85％)。這表明當(dāng)La3+含量相同時，COS-La對刺參免疫刺激效果優(yōu)于單純的La(NO3)3，這可能是COS-La中的殼寡糖起到了一定的協(xié)同作用。
　　

7、3.實驗飼料中添加(NH4)2Ce(NO3)6分別制成含有O、10、25、50和75 mg/kgCe4+的飼料，然后飼喂6.72±0.01g的刺參8周，測定生長、免疫和抗病力等指標(biāo)。研究結(jié)果表明添加50 mg/kg Ce4+顯著提高了刺參特定生長率(0.9-1.2％/d)(P＜0.05)。刺參體腔液的吞噬活性、呼吸爆發(fā)活性、ACP和AKP活性均在75mg/kg時達(dá)到最高(P＜0.05)，但是刺參體腔液細(xì)胞的T-SOD和T-NOS活性沒有

8、顯著性差異(P＞0.05)。攻毒試驗表明，在25和50 mg/kg Ce4+時，刺參累計發(fā)病率低于其它處理組，但是沒有顯著性差異(P＞0.05)，75 mg/kg Ce4+組的累計發(fā)病率有升高趨勢。因此，飼料中添加Ce4+能夠促進(jìn)刺參生長，提高刺參體腔液免疫酶活性，但是對刺參抗病力作用不明顯。
　　4.利用鈰(Ce)可以和殼寡糖配位，制備出Ce4+含量為7.65％的殼寡糖鈰配合物(COS-Ce)。按照飼料配方分別制備含有COS-C

9、e0、150、300、600和1200 mg/kg的實驗飼料，飼喂6.72±0.01g的刺參8周，測定其生長、免疫和抗病力等指標(biāo)。研究結(jié)果表明，600mg/kg的COS-Ce對刺參的生長作用顯著(0.9-1.2％/d)(P＜0.05)，刺參體腔細(xì)胞的吞噬活性、呼吸爆發(fā)活性和免疫酶(T-SOD、ACP及AKP)活性均顯著高于對照組(P＜0.05)。但是添加量為1200 mg/kg時，吞噬活性、呼吸爆發(fā)活性和免疫酶活性均有下降趨勢，可能是由

10、于高劑量COS-Ce中的Ce4+對刺參免疫起到了抑制作用。攻毒試驗的結(jié)果也表明600 mg/kg的COS-Ce提高了刺參的抗病能力(33.33％)(P＜0.05)。對比第三章結(jié)果，600 mg/kgCOS-Ce中Ce4+的含量為45.9 mg/kg，600 mg/kg COS-Ce組的呼吸爆發(fā)活性和T-SOD活性高于50 mg/kg Ce4+組，同時600 mg/kg COS-Ce組的累計發(fā)病率(33.33％)低于50 mg/kg Ce