ApoB48基因多態(tài)性與人頸動(dòng)脈硬化斑塊穩(wěn)定性的關(guān)系分析.pdf

1、背景與目的：
　　頸動(dòng)脈粥樣硬化(carotid artery atherosclerosis，CAA)是腦梗死的危險(xiǎn)因素之一。在CAA基礎(chǔ)之上，斑塊的突然破損（包括破裂和潰瘍形成）、血小板激活、血栓形成等是腦梗死的重要發(fā)病機(jī)制之一。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外大量的研究逐漸從對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化(athero sclerosis，AS)狹窄程度的關(guān)注轉(zhuǎn)移至對(duì)斑塊生物學(xué)特性的研究上來(lái)，而其中斑塊的穩(wěn)定性研究又是其中重要的內(nèi)容之一。
　　在小腸的

2、脂類代謝過(guò)程中載脂蛋白B48(apolipoprotienB48，ApoB48)起著至關(guān)重要的作用，作為ApoB家族中兩大主要的載脂蛋白之一，近些年國(guó)內(nèi)外有關(guān)其合成、代謝機(jī)制等的研究逐漸受到重視。Pal等(2003)的研究證實(shí)ApoB48和ApoB100在人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的含量差與其二者在人類循環(huán)血液中的含量差之間存在著較大差異;研究結(jié)果顯示，ApoB48在人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的含量為ApoB100含量的約1/3-1/5之間，但

3、在循環(huán)血液中差值變大，ApoB48含量縮小至僅為ApoB100含量的約1/40。作為主要的腸源性載脂蛋白，以往多認(rèn)為其在動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸方面的作用微乎其微，但據(jù)近些年國(guó)內(nèi)外有關(guān)動(dòng)物模型研究、臨床試驗(yàn)研究等均得以對(duì)ApoB48在導(dǎo)致高脂血癥(hyperlipidaemia，HLP)發(fā)病繼而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化性疾病發(fā)生的機(jī)制加以證實(shí)，ApoB家族基因變異與動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的關(guān)系的研究也在逐步加深;其中ApoB48基因多態(tài)

4、性與人頸動(dòng)脈粥樣硬化中斑塊的穩(wěn)定性相關(guān)研究尚無(wú)國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)的相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)研究通過(guò)對(duì)ApoB48基因rs121918387、rs3181458位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)與人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性之間遺傳易感相關(guān)性的研究，探討在人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中ApoB48與其斑塊穩(wěn)定性之間的相互作用機(jī)制，并能在人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的基因診斷、斑塊不穩(wěn)定性的預(yù)防、控制、治療及其他可

5、能存在的干預(yù)手段方面，從分子遺傳學(xué)層面為其提供更為確切且可靠的相關(guān)實(shí)驗(yàn)性研究數(shù)據(jù)作為理論依據(jù)給予支持。
　　方法：
　　本實(shí)驗(yàn)研究通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Polymerase Chain Reaction–Restriction Fragment Length Polymorphism，PCR-RFLP)的實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)不穩(wěn)定斑塊組-穩(wěn)定斑塊組進(jìn)行對(duì)照比對(duì)，檢測(cè)并分析入選的鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院血管外科2

6、012年10至2013年12月間收集的河南地區(qū)漢族人群中106例行頸動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫術(shù)（carotid end arterectomy，CEA）的手術(shù)患者，其中不穩(wěn)定斑塊組患者為58例，穩(wěn)定斑塊組患者為48例，收集患者相關(guān)性別、年齡等信息，對(duì)ApoB48基因rs121918387、rs3181458兩位點(diǎn)的基因型、等位基因、單體型的數(shù)據(jù)以及兩者之間的相互關(guān)系進(jìn)行比對(duì)研究。
　　結(jié)果：
　　1.ApoB48基因rs12191838

7、7位點(diǎn)CC、CT和TT基因型的兩組間分布頻率為:不穩(wěn)定斑塊組34.5％、53.4％、12.1％，穩(wěn)定斑塊組39.6％、37.5％、22.9％，表明基因型分布在兩組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。在兩組間等位基因C、T的分布頻率為:不穩(wěn)定斑塊組61.2％、38.8％，穩(wěn)定斑塊組58.3％、41.7％，表明等位基因分布在兩組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。
　　2.ApoB48基因rs3181458位點(diǎn)GG、AG和AA基因型的兩組間分布頻

8、率為:不穩(wěn)定斑塊組48.3％、37.9％、13.8％，穩(wěn)定斑塊組20.8％、41.7％、37.5％，表明基因型分布在兩組間存在顯著差異(x2=35.178，P=0.000＜0.05);GG基因型分布頻率在不穩(wěn)定斑塊組要明顯高于穩(wěn)定斑塊組。兩組間等位基因G、A的分布頻率為:不穩(wěn)定斑塊組68.1％、31.9％，對(duì)照組40.6％、59.4％，兩組間的等位基因分布存在顯著差異(x2=47.381，P=0.000＜0.05);G等位基因分布頻率在

9、不穩(wěn)定斑塊組要明顯高于穩(wěn)定斑塊組;提示可能性:人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定性的高風(fēng)險(xiǎn)性主要傾向于G等位基因或GG基因型的攜帶者。
　　3.ApoB48基因rs121918387、rs3181458位點(diǎn)的連鎖不平衡及單體型分析:結(jié)果表明C-G、T-G單體型與人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定性有正相關(guān)性可能，即在伴有頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊患者中攜帶C-G、T-G單體型之一的個(gè)體，其頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊具有更高的不穩(wěn)定性傾向(ORC-G=2.019，

10、ORT-G=2.218);另一結(jié)果表明C-A、T-A單體型可與人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定性有負(fù)相關(guān)性可能，即在伴有頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊患者中攜帶C-A、T-A單體型之一的個(gè)體，其頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊性質(zhì)傾向不穩(wěn)定性風(fēng)險(xiǎn)較低。(ORC-A=0.326，ORT-A=0.731)。
　　結(jié)論：
　　1.在河南地區(qū)漢族人群中，ApoB48基因rs121918387位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊傾向不穩(wěn)定性風(fēng)險(xiǎn)無(wú)明顯相關(guān)。