連翹花和葉中清除自由基成分分析及其含量測定.pdf

1、目前研究表明,腫瘤、衰老、以及心腦血管疾病等慢性疾病的發(fā)生機(jī)理均與體內(nèi)自由基產(chǎn)生過多或清除自由基能力下降有著密切的關(guān)系。人們發(fā)現(xiàn)抗氧化劑可以清除體內(nèi)過多的自由基。使用最多最廣泛的大多為合成型抗氧化劑,由于合成抗氧化劑潛在的毒性和致癌作用等,逐漸受到人們的排斥。因此,從植物中尋找天然、高效、低毒的抗氧化劑受到越來越廣泛的關(guān)注而成為研究的熱點(diǎn)。
　　 連翹(Forsythia suspense)通常是以果實(shí)入藥,具有清熱解毒、消腫散

2、結(jié)之功效。在我國的河北和陜西等地,連翹葉常被當(dāng)茶飲用,并具有保健的功能。綜合近年來對連翹屬植物的研究結(jié)果得知,同屬植物的葉子與果實(shí)的化學(xué)成分有很好的一致性。已有研究證實(shí),連翹葉提取物有較好的抗氧化和降血脂作用。為了更好的開發(fā)利用天然資源,本實(shí)驗(yàn)對連翹花、葉清除自由基的成分進(jìn)行了分析,并對其含量進(jìn)行了測定,為連翹資源的綜合開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 連翹花和連翹葉于2008年3～10月份采摘于河北醫(yī)科大學(xué)校園內(nèi),經(jīng)烘干,粉碎,過

3、篩,樣品粉末脫脂后用60％甲醇超聲波提取。采用DPPH法和ABTS法,通過與連翹中藥相比較,評價了連翹花、葉清除自由基能力。并采用HPLC-DPPH離線法對連翹花、葉中的清除自由基成分進(jìn)行了分析,利用與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間、紫外光譜以及高效液相-質(zhì)譜數(shù)據(jù)比較進(jìn)行定性分析。繼而對連翹花、葉中清除自由基成分的含量進(jìn)行了測定。結(jié)果如下:
　　 1通過對連翹花、葉及連翹中藥清除自由基活性的測定,表明,連翹花、3～10月份連翹葉及連翹的提取物

4、對DPPH自由基和ABTS自由基均有不同程度的清除作用。連翹花、3～10月份的連翹葉清除DPPH自由基和ABTS自由基的能力都高于連翹；其中,3月份連翹葉的提取物清除自由基能力最強(qiáng),這提示3月份連翹葉是清除自由基的很好的原料來源。
　　 2建立適合分離連翹花、葉及連翹中藥各成分的HPLC分析方法。色譜條件為:色譜柱為Supelcosil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流動相為甲醇-0.8％醋酸水溶液梯度洗脫(0

5、～6 min,25％～30％；6～24 min,30％～35％；24～29 min,35％～39％；29～39 min,39％～45％；39～50 min,45％～60％甲醇)；檢測波長280 nm；流速1.0mL／min；柱溫25℃。
　　 3采用HPLC-DPPH離線法分析連翹花、葉中清除自由基的成分。結(jié)果發(fā)現(xiàn),連翹葉中的1、2、3、4、6號峰對DPPH自由基有清除作用。利用化合物的最大吸收波長、質(zhì)譜圖和標(biāo)準(zhǔn)品保留時間進(jìn)行鑒

6、定,1號峰為綠原酸、4號峰為連翹酯苷、6號峰為蘆丁。同時鑒別出8號峰為連翹苷。
　　 4利用HPLC法對連翹花、葉及連翹中藥中的綠原酸、連翹酯苷、蘆丁、連翹苷的含量進(jìn)行了測定。結(jié)果顯示,3月份連翹葉中綠原酸和連翹苷的含量最高,而蘆丁在連翹花中含量最高。連翹酯苷在連翹葉生長的中期含量高于其他階段。
　　 由上述結(jié)果可知,連翹花、3～10月份連翹葉提取物對DPPH和ABTS自由基清除能力都高于連翹中藥。其中,3月份連翹葉的提