Rsf-1-HBXAP基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的樹突狀細(xì)胞體外抗卵巢癌效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、據(jù)美國的最新癌癥統(tǒng)計(jì)，在女性惡性腫瘤死亡原因中，卵巢癌排名第四位，死亡率居首位。由于缺乏有效的早期篩查手段，70﹪的卵巢癌患者就診時(shí)已屆晚期。雖然近20年來在卵巢癌治療方面取得了長足的進(jìn)展，卵巢癌手術(shù)技巧不斷提高，新型化療藥物、化療方案亦陸續(xù)投入臨床使用，但這些傳統(tǒng)的治療手段均未能顯著改善患者長期生存率，70﹪的晚期卵巢癌患者最終復(fù)發(fā)并死于癌癥。因此尋找特異性強(qiáng)、敏感性高的卵巢癌相關(guān)抗原，并探索有效的綜合治療方法具有重要的臨床意義。近年

2、來，以基因和免疫治療為代表的生物治療作為腫瘤治療的第四模式日益受到重視，作為晚期卵巢癌治療的重要輔助手段之一，生物治療已逐漸顯示出其獨(dú)特的優(yōu)越性。 最近研究發(fā)現(xiàn)：位于11ql3.5的Rsf-1/HBXAP基因的擴(kuò)增在分子遺傳學(xué)、轉(zhuǎn)錄分析、臨床預(yù)后和功能表達(dá)等方面與卵巢、乳腺、頭頸部等惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。Rsf-1/HBXAP基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中對(duì)基因擴(kuò)增與染色質(zhì)調(diào)節(jié)起一定的作用。Rsf-1/HBXAP基因過表達(dá)參與刺激細(xì)胞增

3、殖和惡性轉(zhuǎn)化過程，而基因敲除抑制卵巢癌細(xì)胞的生長和擴(kuò)增。Rsf-1/HBXAP基因在卵巢癌細(xì)胞系中高表達(dá)，在卵巢癌病人腹水細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，并與預(yù)后相關(guān)。因此，Rsf-1/HBXAP基因有望成為卵巢癌免疫生物治療的靶點(diǎn)。 腫瘤的細(xì)胞免疫主要是T細(xì)胞免疫，依賴于有效的抗原遞呈。樹突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)是體內(nèi)功能最強(qiáng)的唯一能夠激活初始型T細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞，是啟動(dòng)、調(diào)控并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)，因此利用DC在患

4、者體內(nèi)建立起腫瘤特異性的、持久的免疫應(yīng)答，是目前將DC腫瘤疫苗用于治療惡性腫瘤的基礎(chǔ)，也是一種有應(yīng)用前景的腫瘤免疫治療的新方法。人類腫瘤抗原與DC結(jié)合成為腫瘤特異性主動(dòng)性免疫治療的手段之一。 本研究以Rsf-1/HBXAP基因作為修飾DC疫苗的靶點(diǎn)進(jìn)行卵巢癌基因及免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究。首先證實(shí)Rsf-l/HBXAP基因高表達(dá)于卵巢癌組織，尤其是漿液性卵巢癌及多數(shù)常見卵巢癌細(xì)胞系中，可以作為卵巢癌免疫生物治療的一個(gè)候選靶點(diǎn)；隨后成功

5、構(gòu)建了含人Rsf-l/HBXAP全長cDNA的真核表達(dá)載體pEGFP-Cl/Rsf-l/HBXAP并將其導(dǎo)入DC，通過對(duì)轉(zhuǎn)染后DC生物學(xué)功能的檢測以及細(xì)胞毒殺傷實(shí)驗(yàn)，闡明Rsf-l/HBXAP基因可以在一定功能上提高DC刺激T細(xì)胞增殖的能力，但對(duì)抗原遞呈能力、內(nèi)吞功能和遷移能力均無明顯影響；Rsf-l/HBXAP基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的CTL體外能夠誘導(dǎo)出可特異性識(shí)別Rsf-l/HBXAP抗原的CTL,并產(chǎn)生針對(duì)Rsf-l/HBXAP+卵巢癌細(xì)胞的殺