OCT-4、MMP-2、MMP-9在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌各亞型中的表達及意義.pdf

1、背景與目的:
　　 乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤,居女性惡性腫瘤的首位,發(fā)病率逐年升高,發(fā)病年齡日益年輕化,嚴(yán)重危害女性的身心健康。目前已得到認可與乳腺癌預(yù)后相關(guān)的因素包括腫瘤大小、組織學(xué)類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、雌孕激素受體等。但要對腫瘤進展和做出預(yù)后評估還不夠全面。乳腺癌標(biāo)志物的檢測可反映腫瘤的生物學(xué)特性。
　　 隨著乳腺癌研究的不斷深入,人們注意到腫瘤細胞生物學(xué)特性的差異可能是導(dǎo)致同一期別乳腺癌患者預(yù)后存在差異的因

2、為。目前根據(jù)基因表達分析可以將浸潤性乳腺癌分為LuminalA型、Lumina1B型、Basal-like型、HER-2型等不同的分子亞型,不同亞型乳腺癌對治療的反應(yīng)和預(yù)后存在顯著差異。
　　 乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展是一個多階段多步驟的復(fù)雜過程,隨著對干細胞和腫瘤起源的研究,人們認識到乳腺癌為一種干細胞疾病。在維持干細胞的未分化狀態(tài)和調(diào)節(jié)干細胞的分化過程起著關(guān)鍵性作用的干細胞特異性基因Oct-4,其表達的上調(diào)和下調(diào)直接影響著干細胞向

3、不同的方向分化,通過正調(diào)控與維持細胞全能或多能性狀態(tài)所需基因的轉(zhuǎn)錄,或者負調(diào)控與體細胞分化有關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄來協(xié)調(diào)細胞的分化。惡性腫瘤的的浸潤和轉(zhuǎn)移是腫瘤患者的主要死亡因為之一。人們通過對腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移機制的研究,發(fā)現(xiàn)細胞外基質(zhì)(extraeellularmatrix,ECM)在腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移過程中起著關(guān)鍵作用。腫瘤細胞在侵襲和轉(zhuǎn)移過程中必須破壞ECM,而基質(zhì)金屬蛋白酶類(matrix metallopmteinases,MMPs)在其過

4、程中起主要作用,尤其是MMP-2、MMP-9與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移關(guān)系最為密切。研究表明,MMP-2、MMP-9可以作為乳腺癌惡性程度和判斷預(yù)后的一個有用的指標(biāo),并有可能成為乳腺癌治療的靶點。本研究根據(jù)雌激素受體(estrogenreceptor,ER)、孕激素受體(progesteroreceptot,PR)和人表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptozr-2,HER-2)的免疫組化結(jié)

5、果,對120例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者進行分子分型,把病例分為Luminal A、Luminal B、Basal-like、HER2過表達等不同的亞型。并采用免疫組織化學(xué)方法(S-P法)檢測OCT-4、MMP-2和MMP-9在乳腺癌各亞型組織中的變化特征,探討OCT-4、MMP-2和MMP-9三者與各亞型乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后的相關(guān)性,為臨床乳腺癌生物防治提供實驗依據(jù)。
　　 材料和方法:
　　 1.實驗材料:120例乳腺

6、癌患者標(biāo)本來自河南省鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2006年3月至2007年1月手術(shù)切除標(biāo)本,均為女性,年齡33～75歲,中位年齡51歲,患者術(shù)前均未接受化療、放療及其它治療。所有標(biāo)本經(jīng)組織病理學(xué)檢查證實為乳腺浸潤性導(dǎo)管癌并ER、PR、HER-2檢測資料完整。所有手術(shù)切除標(biāo)本均經(jīng)10％甲醛固定、石蠟包埋、連續(xù)切片,進行組織病理學(xué)和免疫組化檢查。
　　 2.實驗方法:免疫組化采用S-P法檢測乳腺癌組織中OCT-4、MMP-2和MMP-9的表

7、達。
　　 3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計:采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件處理,各組間率的比較采用x2檢驗,小樣本用直接概率法計算,α=0.05作為檢驗標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.根據(jù)基因表達情況分為Luminal A、Luminal B、Basal-like、HER2過表達等不同的亞型,其中Luminal A型38.33％(46/120),Luminal B型21.67％(26/120),Basal-like型26.67％(3

8、2/120),HER2過表達型13.33％(16/120)。其中Luminal A淋巴轉(zhuǎn)移率為43.48％(20/46),Luminal B淋巴轉(zhuǎn)移率為53.85％(14/26),Basal-like淋巴轉(zhuǎn)移率為25.00％(8/32),HER2過表達淋巴轉(zhuǎn)移率為23.08％(3/16),各組之間有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 2.OCT-4表達定位于細胞核,陽性標(biāo)志為細胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒,OCT-4陽性表達率為19.17

9、％(23/120)。按生物學(xué)分型OCT-4在乳腺癌組織中免疫反應(yīng)陽性率分別為:Luminal A17.39％(8/46)、Luminal B19.23％(5/26)、Basal-like18.75％(6/32)、HER2過表達25.00％(4/16),各組之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。OCT-4在Luminal A中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為10.00％(2/20),在Luminal A中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為23.08％(6

10、/26),兩者陽性表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。OCT-4在Luminal B中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為35.71％(5/14).在Luminal B中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為0％(0/12),兩者陽性表達有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。OCT-4在Basal-like中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為40.00％(4/10),在Basal-like中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為9.09％(2/22),兩者陽性表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0

11、.05)。OCT-4在HER2過表達中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為75.00％(3/4),在HER2過表達中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為8.33％(1/12),兩者陽性表達有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。OCT-4的表達與ER、PR、HER-2的表達均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 3.MMP-2主要表達于乳腺癌癌細胞的胞漿,陽性標(biāo)志為胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒,MMP-2陽性表達率為50.83％(61/120)。按生物學(xué)分型MMP

12、-2在乳腺癌各型中陽性率分別為:Luminal A45.65％(21/46)、Luminal B61.54％(16/26)、Basal-like50.00％(16/32)、HER2過表達50.00％(8/16),各組之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。MMP-2在Luminal A中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為45.00％(9/20),在Luminal A中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為46.15％(12/26),兩者陽性表達率無統(tǒng)計學(xué)意義(

13、P>0.05)。MMP-2在Luminal B中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為71.43％(10/14),在Luminal B中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為50.00％(6/12),兩者陽性表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。MMP-2在Basal-like中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為87.50％(7/8),在Basal-like中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為27.50％(9/24),兩者陽性表達有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。MMP-2在HE

14、R2過表達中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為100％(3/3),在HER2過表達中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為23.08％(5/13),兩者陽性表達有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 4.MMP-9主要表達于乳腺癌癌細胞的胞漿,陽性標(biāo)志為胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒,MMP-9陽性表達率為55.83％(67/120)。按生物學(xué)分型MMP-9在乳腺癌組織中免疫反應(yīng)陽性率分別為:Luminal A63.04％(29/46)、Luminal B5

15、3.85％(14/26)、Basal-like50.00％(16/32)、HER2過表達50.00％(8/16),各組之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。MMP-9在Luminal A中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為80.00％(16/20),在Luminal A中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為50.00％(13/26),兩者陽性表達有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。MMP-9在Luminal B中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為57.14％(8/14)

16、,在Luminal B中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為50.00％(6/12),兩者陽性表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。MMP-9在Basal-like中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為40.00％(4/10),在Basal-like中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中陽性率為54.55％(12/22),兩者陽性表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。MMP-9在HER2過表達中局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性率為100％(4/4),在HER2過表達中局部淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組中

17、陽性率為33.33％(4/12),兩者陽性表達有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.乳腺癌按照生物學(xué)特性分為不同亞型,各型之間與是否有局部淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移存在明顯相關(guān)性。
　　 2.MMP-2、MMP-9在乳腺癌組織中的陽性表達率高,表明二者參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程。
　　 3.MMP-2和MMP-9的表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)性,提示MMP-2和MMP-9可能是判斷乳腺癌預(yù)后的重要