別嘌呤醇對(duì)心肌梗死后大鼠心室重塑和功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景和目的：心肌梗死后心室重塑主要包括心肌細(xì)胞重塑與間質(zhì)重塑，表現(xiàn)為梗死區(qū)的擴(kuò)展、非梗死區(qū)代償性肥厚和心室腔的擴(kuò)張，最終導(dǎo)致心臟舒縮功能惡化。心肌梗死后心肌間質(zhì)重塑主要表現(xiàn)為間質(zhì)膠原種類、含量、比例和分布的動(dòng)態(tài)改變，其中Ⅰ、Ⅲ型膠原在確保鄰近心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性起重要作用，二者的相對(duì)變化可以反映心肌組織的重塑，綜合判斷膠原沉積量及Ⅰ/Ⅲ型膠原比值可以反映心肌梗死后膠原重塑的進(jìn)程。心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡是觸發(fā)心室重塑導(dǎo)致心力衰竭的重要原

2、因，缺血心肌中產(chǎn)生的大量活性氧(reactiveoxygen species，ROS)可直接誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡。既往實(shí)驗(yàn)表明，作為缺血心肌細(xì)胞中催化產(chǎn)生ROS的主要酶源之一，黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase，XO)在心衰進(jìn)程中大量表達(dá)和激活，介導(dǎo)心肌細(xì)胞肥厚和心室腔擴(kuò)張。基于此，本研究擬探討黃嘌呤氧化酶抑制劑別嘌呤醇(allopurinol)對(duì)心肌梗死后大鼠心肌膠原重塑、心肌細(xì)胞凋亡和心室重塑和功能的影響。 方法：結(jié)扎

3、冠脈前降支制作大鼠心肌梗死模型，隨機(jī)分為別嘌呤醇治療組(allo組，50mg/kg·day)，心肌梗死組(MI組)和假手術(shù)組(sham組)，每組分別于7天，14天，21天，28天時(shí)取5只大鼠用化學(xué)比色法測(cè)定心肌組織膠原含量、XO和清除活性氧活力，天狼猩紅染色法測(cè)定Ⅰ、Ⅲ型膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)及膠原Ⅰ/Ⅲ比值，RT-PCR法測(cè)定Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA的改變。28天時(shí)觀察超聲心動(dòng)圖和血流動(dòng)力學(xué)的變化，并檢測(cè)左心室質(zhì)量指數(shù)和心肌梗死面積；用T

4、UNEL法檢測(cè)非梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)，免疫組化法檢測(cè)Fas蛋白表達(dá)，Western blot檢測(cè)XO和Caspase 3蛋白表達(dá)。 結(jié)果： 與sham組比較，MI組心肌組織膠原含量于術(shù)后7天已經(jīng)明顯升高，14天達(dá)峰值后下降，但到28天時(shí)仍顯著高于sham組(P＜0.01)。在左心室非梗死區(qū)，MI組Ⅰ型CVF在術(shù)后7天已經(jīng)明顯升高，14天時(shí)達(dá)峰值后輕度下降，Ⅲ型CVF在7天時(shí)也明顯升高，以后雖有下降趨勢(shì)，但下降幅度不大(

5、P＜0.01)；Ⅰ/Ⅲ比值于術(shù)后7天時(shí)顯著低于sham組(P＜0.01)，14天時(shí)反轉(zhuǎn)升高達(dá)峰值，但與sham組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，以后輕度下降，28天時(shí)非常接近sham組(P＞0.05)。 Ⅰ型膠原mRNA水平在MI后第7天時(shí)已經(jīng)顯著升高，第14天時(shí)進(jìn)一步升高，第21天時(shí)有所下降，但仍維持在較高的水平，這三個(gè)時(shí)點(diǎn)的Ⅰ型膠原mRNA水平均顯著高于sham組，差別有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，在第28天時(shí)Ⅰ型膠

6、原mRNA水平明顯回落，但與sham組比較差別仍有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；Ⅲ型膠原mRNA水平在第7天時(shí)也顯著升高，以后呈下降趨勢(shì)，第21天時(shí)仍顯著高于sham組(P＜0.01)，至28天時(shí)降至sham組水平(P＞0.05)。 在各時(shí)刻點(diǎn)，MI組心肌組織清除超氧陰離子(O2)、羥自由基(OH)的活力均明顯降低，XO活力明顯升高(P＜0.01)。 MI組在心肌梗死后第28天，左心室質(zhì)量和質(zhì)量指數(shù)明顯升高(P＜0.01)；

7、超聲心動(dòng)圖結(jié)果表明，MI組左心室室間隔和左心室后壁增厚，舒張末期內(nèi)徑和收縮末期內(nèi)徑增寬，射血分?jǐn)?shù)和短軸縮短分?jǐn)?shù)降低(P＜0.01)；血流動(dòng)力學(xué)顯示左心室舒張末壓明顯升高，而收縮壓顯著降低(P＜0.01)。 MI組非梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)升高，F(xiàn)as、XO、Caspase3蛋白表達(dá)顯著增強(qiáng)(P＜0.05或P＜0.01)。 與MI組比較，別嘌呤醇組明顯減輕了上述指標(biāo)的變化(P＜0.05或P＜0.01)。但梗死區(qū)Ⅰ、Ⅲ型膠原容