三葉因子1對誘導性的ICAM1與VCAM1表達的影響.pdf

1、研究目的： 探討腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α)刺激后胃黏膜上皮細胞GES-1細胞間粘附分子1(Intercellular adhesion molecule1，ICAM1)、血管細胞黏附分子1(Vascular cell adhesion molecule1，VCAM1)表達變化，以及TFF1(Trefoil factor family1，TFF1)過表達對GES-1細胞中TNF-

2、α誘導的ICAM1、VCAM1表達的影響。 研究方法： 以永生化的胃黏膜上皮細胞株GES-1為研究對象，采用不同濃度的人重組TNF-α刺激該細胞株，RT-PCR和Western Blot方法檢測不同時相ICAM1、VCAM1在mRNA和蛋白水平的表達變化；細胞免疫熒光檢測刺激前后NF-κB(Nuclearf Factor-kappa B，NF-κB) p65蛋白的細胞定位情況。采用質(zhì)粒重組的方法構(gòu)建TFF1真核細胞表達質(zhì)

3、粒，將重組質(zhì)粒pIRES2-EGFP-TFF1瞬時轉(zhuǎn)染GES-1細胞，Western Blot檢測轉(zhuǎn)染前后TNF-α誘導性ICAM1、VCAM1的表達變化。 研究結(jié)果： 1.TNF-α可誘導GES-1細胞表達ICAM1、VCAM1，隨著TNF-α濃度與誘導時間的增加，二者的表達量上調(diào)。 2.TNF-α刺激后GES-1細胞中NF-κB p65蛋白呈現(xiàn)出從細胞質(zhì)到細胞核的易位。 3.重組質(zhì)粒pIRES2-EG