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文檔簡介
1、本論文分別以2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-P-dioxin,TCDD)和3,3',4,4'-四氯聯(lián)苯(3,3',4,4'-tetrachlorobiphenyl,PCB77)對斑馬魚(Brachydanio rerio/Danio rerio)組織結(jié)構(gòu)的影響為切入點,找出這2種二噁英類化合物(dioxin-like compounds,DLCs)作用于斑馬魚的靶器官,研究2種DL
2、Cs對斑馬魚肝臟脂質(zhì)過氧化作用及CYP1A蛋白的誘導(dǎo),探索DLCs的毒性作用與斑馬魚肝臟脂質(zhì)過氧化作用、CYP1A蛋白的誘導(dǎo)之間的內(nèi)在聯(lián)系,為進一步研究DLCs的分子毒理機制提供理論依據(jù)。試驗根據(jù)染毒物質(zhì)及劑量的不同將斑馬魚分成10組:TCDD染毒組(染毒劑量分別為0.1μg/L、0.2μg/L、0.4μg/L和0.8μg/L)和空白對照組:PCB77染毒組(染毒劑量分別為0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L和0.8mg
3、/L)和空白對照組,采用水浴染毒,水溫控制在25~28℃。分別進行如下研究:(1)研究TCDD和PCB77對斑馬魚組織結(jié)構(gòu)的影響;(2)研究TCDD和PCB77對斑馬魚肝臟MDA含量、SOD和GST活性的影響,分析其脂質(zhì)過氧化作用;(3)研究TCDD和PCB77對斑馬魚肝臟CYPlA蛋白的誘導(dǎo)作用。試驗結(jié)果表明:病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn),染毒7d后,TCDD和PCB77分別對斑馬魚的肝臟有著明顯的毒性作用,能引起肝細胞核移位偏離中心,細胞破裂
4、溶解等現(xiàn)象。TCDD和PCB77還能引起斑馬魚腸道上皮細胞的壞死、微絨毛減少,心肌細胞發(fā)生不同程度的變性,脾臟淋巴細胞排列疏松、壞死溶解等。但對斑馬魚的腦組織結(jié)構(gòu)無明顯影響。肝臟脂質(zhì)過氧化作用明顯,染毒5d后,與對照組相比,TCDD各染毒組MDA含量增加,其中0.2μg/L、0.4μg/L、0.8μg/L組差異顯著(P<0.05);各染毒組SOD活力下降,其中0.2μg/L、0.4μg/L、0.8μg/L組差異顯著(P<0.05);各染
5、毒組GST活力下降,且都差異顯著;PCB77各染毒組MDA含量增加,其中0.2mg/L、0.4mg/L、0.8mg/L組差異顯著(P<0.05);各染毒組SOD活力下降,且都差異顯著;各染毒組GST活力下降,其中0.2mg/L、0.4mg/L、0.8mg/L組GST活力明顯下降(P<0.05)。 利用酶聯(lián)免疫吸附法測定肝臟CYP1A蛋白水平的試驗結(jié)果顯示,染毒7d后,與對照組相比,TCDD各染毒組肝臟的CYP1A蛋白含量都有所增
6、加,其中0.1μg/L、0.2μg/L組差異不顯著(P>0.05),0.4μg/L、0.8μg/L組差異顯著(P<0.05)。PCB77各染毒組肝臟的CYP1A含量也都有所增加,其中0.1mg/L、0.2mg/L組差異不顯著(P>0.05),0.4mg/L、0.8mg/L組差異顯著(P<0.05),0.8mg/L組斑馬魚肝臟CYP1A蛋白含量明顯高于其它各染毒組(P<0.05)。本研究得到如下結(jié)論:1.斑馬魚的肝臟是TCDD和PCB77
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