胰島素干預(yù)對(duì)糖尿病鼠骨折愈合過(guò)程中PDGF表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景
　　 多年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者借助組織化學(xué)、組織學(xué)、組織形態(tài)計(jì)量學(xué)、生物力學(xué)等手段對(duì)骨折愈合進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)血小板衍生生長(zhǎng)因子（Platelet-derived growth factor，PDGF）在骨折愈合過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。糖尿病對(duì)骨折愈合的影響已經(jīng)有許多組織形態(tài)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)研究，揭示了許多細(xì)胞因子在糖尿病大鼠骨折愈合過(guò)程中的作用。其中也包括PDGF在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。但是胰島素干預(yù)究竟對(duì)糖尿病大鼠骨折愈合過(guò)程

2、中PDGF產(chǎn)生什么影響尚無(wú)系統(tǒng)化的研究。
　　 目的
　　 （1）探討糖尿病大鼠骨痂組織內(nèi)PDGF的表達(dá)水平。
　　 （2）探討糖尿病大鼠骨折愈合能力的降低是否與PDGF的表達(dá)異常有關(guān)。
　　 （3）探討胰島素干預(yù)治療后骨折愈合的改善情況及PDGF的表達(dá)的變化。
　　 方法：
　　 將55只雄性Wister大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，隨機(jī)分為糖尿病組（40只）和對(duì)照組（15只）。糖尿病模型采用生理

3、鹽水配制的四氧嘧啶，從大鼠腹腔注入，破壞胰島細(xì)胞誘導(dǎo)糖尿病。共成功制作糖尿病模型36只。
　　 上述糖尿病大鼠成功模型36只和對(duì)照組15只大鼠，在無(wú)菌條件下，顯露右脛骨，線鋸鋸斷脛骨平臺(tái)下約0.7cm，給予直徑1mm克氏針?biāo)鑳?nèi)固定術(shù)，術(shù)后縫合、簡(jiǎn)單包扎。
　　 糖尿病組再隨機(jī)分為兩組：胰島素治療組（18只）和非胰島素治療組（18只），三組動(dòng)物分籠飼養(yǎng)。術(shù)后1天治療組開(kāi)始腹部皮下胰島素注射，每同一次，其余兩組注射等量生理鹽

4、水。術(shù)后每周測(cè)動(dòng)物模型的空腹血糖、尿糖及尿酮。手術(shù)后3天、1、2、4、6周，每組隨機(jī)抽取3只大鼠，抽取空腹血測(cè)量血糖，拍攝右脛骨正側(cè)位X線片，然后斷頸法處死，取脛腓骨全長(zhǎng)，剔除軟組織，生理鹽水沖洗干凈，切取骨折部位，脫鈣、HE染色，免疫組化檢測(cè)，光鏡下觀察。
　　 所有定量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（（）±S）表示，SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，糖尿病組與對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)采用組間兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；定性數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，按照檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0

5、.05，P<0.05作為有顯著性差異的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 （1）X線結(jié)果：在各時(shí)間點(diǎn)上，非胰島素治療組的骨痂形成比對(duì)照組及胰島素治療組均減少。
　　 （2）組織化學(xué)染色顯色：各時(shí)間點(diǎn)的大鼠骨折處骨痂細(xì)胞，對(duì)照組及胰島素治療組明顯多于非胰島素治療組。
　　 （3）免疫組化：各時(shí)間點(diǎn)的PDGF-AA，PDGF-BB在骨痂及骨膜內(nèi)的表達(dá)，非胰島素治療組明顯低于對(duì)照組和胰島素治療組。而對(duì)照組與胰島素治

6、療組的表達(dá)無(wú)明顯區(qū)別。
　　 結(jié)論：
　　 1.糖尿病使大鼠骨折后骨痂組織生長(zhǎng)及骨痂內(nèi)PDGF-AA.、PDGF-BB生成量減少，是糖尿病大鼠骨折愈合差的一個(gè)重要原因。
　　 2.PDGF-AA、PDGF-BB在大鼠骨折處骨膜內(nèi)的表達(dá)，說(shuō)明PGDF對(duì)骨折愈合有一定的促進(jìn)作用。
　　 3.胰島素治療后可顯著增加糖尿病大鼠骨折局部PDGF-AA、PDGF-BB的表達(dá)。
　　 4.胰島素治療可增加骨折局