非CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)對膀胱癌T-24細胞增殖的影響.pdf

1、目的: 探討非CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)對膀胱癌T-24細胞增殖的影響,非CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)與CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)有無區(qū)別。
　　方法: 對膀胱癌 T-24細胞采取非CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)在(37℃、大氣環(huán)境)培養(yǎng)箱(稱為大氣-B組)和(37℃、5％CO2)培養(yǎng)箱(稱為 CO2-B組)條件下,及CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)在(37℃、大氣環(huán)境)培養(yǎng)箱(稱為大氣-A組)和(37℃、5%CO2)培養(yǎng)箱(稱為CO2-A組)條件下進

2、行培養(yǎng),檢測分析兩種體系培養(yǎng)基連續(xù)7天pH的比較;采用細胞增殖曲線及克隆形成實驗檢測細胞生長差異情況;采用流式細胞術(shù)檢測分析兩種系統(tǒng)對細胞周期及凋亡率影響的比較;并使用RT-PCR、Western blot技術(shù)檢測分析兩種系統(tǒng)下的膀胱癌細胞中survivin、caspase-3基因及蛋白的表達情況。
　　結(jié)果: 1、pH值:非CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)(37℃、大氣環(huán)境)培養(yǎng)箱條件下培養(yǎng)基與CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)(37℃、5%CO

3、2)培養(yǎng)箱條件下培養(yǎng)基連續(xù)7天pH值穩(wěn)定在7.4左右(P>0.05);而CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)(37℃、大氣環(huán)境)培養(yǎng)箱條件下培養(yǎng)基pH值在8.8左右,其高于CO2依賴型細胞培養(yǎng)系統(tǒng)(37℃、5%CO2)培養(yǎng)箱條件下培養(yǎng)基pH值(P<0.05)。
　　2、細胞克隆數(shù):大氣-B組細胞克隆數(shù)(324±11)與CO2-A組(320±15)細胞克隆數(shù)基本相同(P>0.05);而大氣-A組細胞克隆數(shù)(66±6)比CO2-A組細胞克隆數(shù)減少

4、(P<0.05)。
　　3、細胞生長增殖曲線:大氣-B組與CO2-A組細胞生長增殖趨勢基本一致(P>0.05);而大氣-A組比CO2-A組細胞生長增殖下降(P<0.05)。
　　4、細胞凋亡率:細胞在大氣-B組與CO2-A組條件下培養(yǎng),隨著作用時間的延長細胞凋亡數(shù)增加,凋亡率相比無明顯變化(P>0.05);而在大氣-A組條件下比CO2-A組條件下細胞凋亡數(shù)增加(P<0.05)。
　　5、RT-PCR及Western b