荷斯坦奶牛泌乳曲線及與產(chǎn)奶性狀相關(guān)的AGPAT6、ABCA1基因的多態(tài)性研究.pdf

1、本研究采用Wood等四種模型分別對(duì)荷斯坦奶牛泌乳曲線進(jìn)行擬合，以期選出最佳擬合模型，為準(zhǔn)確預(yù)測該牛場奶牛305d產(chǎn)奶量奠定基礎(chǔ)，并為進(jìn)一步研究荷斯坦奶牛的生產(chǎn)性能和泌乳規(guī)律提供參考依據(jù);采用DNA池和PCR-SSCP法篩選AGPAT6和ABCA1基因SNP位點(diǎn)，結(jié)合HRM技術(shù)進(jìn)行基因分型，研究基因變異和產(chǎn)奶量及奶成分的相關(guān)性;并進(jìn)一步對(duì)AGPA T6基因mRNA的表達(dá)分析和啟動(dòng)子甲基化分析，初步為揭示AGPAT6基因影響奶牛產(chǎn)奶性狀的分

2、子調(diào)控機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:
　　1.荷斯坦奶牛泌乳曲線的擬合分析
　　利用SPSS17.0軟件對(duì)荷斯坦奶牛305d產(chǎn)奶量進(jìn)行曲線擬合。結(jié)果表明:六次多項(xiàng)式模型為荷斯坦奶牛最佳泌乳曲線模型，其對(duì)各胎次泌乳曲線的擬合效果都較為理想。模型極顯著影響泌乳曲線的擬合度R2（P＜0.01），胎次對(duì)泌乳曲線擬合度R2無顯著性影響(P＞0.05)。
　　2.AGPAT6基因多態(tài)性及其與產(chǎn)奶性狀的相關(guān)分析
　　(1)A

3、GPAT6基因8個(gè)(P1～P8)基因座中，在P1(exon1)、P2(exon3)、P3(intron3)、P6(intron8)、P7(intron9)和P8(intron11)中各檢測到1個(gè)SNP，P4和P5中沒有檢測到多態(tài)性位點(diǎn)。每個(gè)SNP均有三種基因型。實(shí)驗(yàn)牛群在這6個(gè)SNP s均處于中度多態(tài)(0.25＜PIC≤0.5)。
　　(2)利用SPSS17.0軟件中的最小二乘法線性擬合模型對(duì)6個(gè)SNP s與奶牛產(chǎn)奶量和乳成分進(jìn)行

4、相關(guān)性分析。結(jié)果表明:P1位點(diǎn)不同基因型顯著影響乳成分(P＜0.05)，P2、P3、P6和P8位點(diǎn)的不同基因型顯著影響產(chǎn)奶量和乳成分，P7位點(diǎn)不同基因型顯著影響產(chǎn)奶量、乳脂率和非脂固形物(P＜0.05)，乳蛋白率無顯著差異(P＞0.05)。
　　3.ABCA1基因多態(tài)性及其與產(chǎn)奶性狀的相關(guān)分析
　　在ABCA1基因3個(gè)外顯子中，只在exon7中檢測到一個(gè)SNP。此位點(diǎn)有TT、TC和CC三種基因型。實(shí)驗(yàn)牛群在此位點(diǎn)為中度多態(tài)(

5、0.25＜PIC≤0.5)，處于Hardy-Weinberg不平衡狀態(tài)。將此位點(diǎn)與荷斯坦奶牛的產(chǎn)奶性狀進(jìn)行相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)不同基因型個(gè)體的產(chǎn)奶量存在極顯著差異(P＜0.01)，而不同基因型個(gè)體乳脂率和乳蛋白率無顯著性差異（P＞0.05）。
　　4.AGPAT6基因mRNA表達(dá)分析和啟動(dòng)子甲基化分析
　　(1)利用奶牛乳汁體細(xì)胞提取總RNA，研究同胎次產(chǎn)奶量接近而乳脂率不同的AGPAT6基因P2位點(diǎn)不同基因型個(gè)體mRNA表達(dá)水平