乏氧選擇性茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮肟衍生物抗腫瘤前藥的設(shè)計(jì)、合成與體外細(xì)胞毒性研究.pdf

1、腫瘤的乏氧環(huán)境為腫瘤的治療提供了靶點(diǎn),生物還原性藥物能選擇性地抑制乏氧腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),氮氧化物是其中具有代表性、有發(fā)展前景的一類化合物。喹喔啉類氮氧化物茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮屬于氮氧化物的一種,具有一定的乏氧選擇活性,但其溶解性較差導(dǎo)致擴(kuò)散能力弱,限制了其應(yīng)用。
　　針對(duì)茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮脂溶性差的缺點(diǎn),以鄰苯二胺、水合茚三酮為起始原料,經(jīng)縮合、肟化、醚化、氧化和胺化反應(yīng)得到不

2、同側(cè)鏈長(zhǎng)度及端位取代基的茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮肟醚化合物。探討溶劑、試劑等反應(yīng)條件對(duì)收率的影響。采用IR、NMR、MS等手段對(duì)產(chǎn)物及中間體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征;采用MTT法分別在常氧和乏氧條件下測(cè)定了茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮肟醚對(duì) Hela、A549、MCF-7細(xì)胞系的體外細(xì)胞毒性,計(jì)算乏氧毒性比,探討側(cè)鏈長(zhǎng)度及端位取代基的結(jié)構(gòu)對(duì)乏氧毒性比的影響;采用 PI單染法檢測(cè)法及 Annexin V/

3、PI雙染法凋亡檢測(cè) II-a對(duì)Hela細(xì)胞周期的阻滯情況及凋亡作用;采用彗星實(shí)驗(yàn)在常氧及乏氧條件下檢測(cè)IV-a對(duì)Hela細(xì)胞DNA的損傷情況,探究茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮肟醚產(chǎn)生乏氧選擇活性的機(jī)制。
　　結(jié)果表明:肟醚鏈及端位取代基的引入,分子的脂溶性增大了3倍,水溶性增強(qiáng)了2倍。MTT結(jié)果顯示茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮肟醚具有較高的細(xì)胞毒性及一定的乏氧選擇活性,化合物IV-a的乏氧條

4、件下對(duì)于A549細(xì)胞IC50達(dá)到了2.34μmol/L,乏氧毒性比(HCR)為2.7。肟醚鏈及端位取代基引入后增大了化合物的細(xì)胞毒性與乏氧選擇活性。當(dāng)端位取代基相同時(shí),側(cè)鏈的長(zhǎng)度越短化合物乏氧選擇活性越強(qiáng),當(dāng)側(cè)鏈長(zhǎng)度相同時(shí),端位取代基修飾的茚(1,2-b)喹喔啉-5,10-二氧-11-酮肟醚乏氧毒性比的順序?yàn)檫哙?吡咯>二丁胺>嗎啉。細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明化合物II-a能將Hela細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期,引起細(xì)胞凋亡,

5、且隨著化合物濃度的增大,細(xì)胞周期阻礙及細(xì)胞凋亡現(xiàn)象更加明顯;當(dāng)II-a濃度從5μmol/L升至10μmol/L后Hela細(xì)胞的G0/G1期比例從57.33％升至68.83%,早期凋亡比例從31.25%升至55.62%,晚期凋亡比例從0.13%升至2.20%。彗星實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明化合物IV-a在乏氧條件下對(duì)Hela細(xì)胞DNA的損傷程度比在常氧條件下更加明顯。在常氧條件下control組尾部DNA百分含量為0.01%,加藥組為3.63%,乏氧條