中藥色譜指紋圖譜研究及化學計量學方法的應用.pdf

1、當前的中藥現(xiàn)代化是在信息化時代，科學技術(shù)高度發(fā)展，人們重新崇尚回歸自然及我國對外開放，面向全球的大環(huán)境下的又一次新的浪潮。盡管中藥所含物質(zhì)群非常復雜，但聯(lián)用儀器和相關(guān)化學計量學方法的快速發(fā)展為中藥這一復雜體系的分析與質(zhì)量控制提供了強有力的手段和廣闊的前景。近年來，指紋圖譜技術(shù)在國際上已廣泛達成共識，色譜指紋圖譜質(zhì)量控制是中藥質(zhì)量控制領域的熱點和趨勢。本論文以實際中藥體系為研究對象，利用HPLC-DAD和GC-MS聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合相關(guān)化學計

2、量學方法，進行中藥色譜指紋圖譜研究，為中藥質(zhì)量控制及藥理、藥效研究提供基礎數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。
　　 論文的第一部分即第一章，論述了近年來我國中藥質(zhì)量控制模式的發(fā)展狀況，中藥指紋圖譜，現(xiàn)代分析技術(shù)以及化學計量學解析分辨技術(shù)和模式識別方法在中藥質(zhì)量控制中的應用等內(nèi)容。
　　 第二部分為HPLC-DAD聯(lián)用技術(shù)和相關(guān)化學計量學方法用于中藥枳實色譜指紋圖譜的研究(第二章和第三章)。其中，第二章詳細地闡述了枳實中黃酮類成分的高效液相

3、指紋圖譜研究。內(nèi)容主要包括樣品提取條件和色譜分離條件的優(yōu)化；成分分析，尤其是活性化合物的定性定量分析；首次將直觀推導式演進特征投影法(heuristicevolving latent projections，HELP)用于枳實二維液相色譜指紋圖譜中重疊色譜峰的解析；相似度比較分析法(Similarity comparative analysis，SCA)用于12批枳實的分析等。第三章在第二章的基礎上將化學模式識別方法--主成分分析法(P

4、rincipal component analysis，PCA)和聚類分析法(Hierarchical clustering analysis，HCA)用于不同來源的38個枳實樣本的色譜指紋圖譜研究，對兩類樣本的指紋圖譜的共有模式及可疑樣本的指紋圖譜進行比較分析，對活性化合物進行定量分析。發(fā)現(xiàn)，中藥(材)由于來源復雜(如產(chǎn)地)、采集時間、炮制方法、儲存條件、儲存年限等不同，使得其所含有的化學物質(zhì)在種類和含量上(特別是活性化合物的含量)存

5、在較大差異，建議有關(guān)部門應趁早采取措施，規(guī)范藥材中那些已明確藥理作用的活性化合物的測定方法和含量指標；對中藥材進行分類研究時，以完整的色譜指紋圖譜數(shù)據(jù)做輸入變量比以少數(shù)主要色譜峰的峰面積做輸入變量更能彰顯樣本所包含的化學物質(zhì)的全部信息及發(fā)現(xiàn)可疑樣本。研究表明，將化學計量學方法與中藥指紋圖譜研究相結(jié)合是科學的、全面的，有利于中藥質(zhì)量控制。
　　 第三部分為三種化學計量學分辨方法用于藥對紫蘇-藿香揮發(fā)油成分的分析(第四章)。在這一部

6、分中，詳細地論述了三種化學計量學分辨方法--交替移動窗口因子法(Alternative moving windowfactor analysis，AMWFA)、直觀推導式演進特征投影法(HELP)和選擇性離子分析法(Selective ion analysis，SIA)；首次同時運用上述三種分辨方法解析藥對紫蘇-藿香及其單味藥揮發(fā)油成分的GC-MS數(shù)據(jù)；此外，計算程序升溫保留指數(shù)(Temperature-programmedretent

7、ion indices，PTRIs)，用來輔助化合物的定性分析。所獲結(jié)果表明，綜合運用此三種化學計量學分辨方法能比較全面地對中藥的揮發(fā)油成分進行解析，鑒定出更多的組份，使定性定量分析更準確。比較分析藥對及其單味藥的揮發(fā)油成分，發(fā)現(xiàn)藥對紫蘇-藿香的揮發(fā)油成分的總數(shù)目略小于兩個單味藥的揮發(fā)油成分的數(shù)目之和，藥對揮發(fā)性成分中的主要成分均來自兩單味藥。所得結(jié)果為探索該藥對的藥理作用及其與單味藥的化學成分的關(guān)系提供理論基礎，為復方中藥研究提供新思

8、路。
　　 第四部分為直觀推導式演進特征投影法(HELP)用于不同藥用部位的厚樸揮發(fā)油成分的分析(第五章)。首次利用HELP法對湖南產(chǎn)凹葉厚樸的不同藥用部位(干皮、枝皮和根皮)的揮發(fā)油成分的GC-MS數(shù)據(jù)進行解析。同時，計算程序升溫保留指數(shù)(PTRIs)，提高定性分析的可靠性。結(jié)果：從厚樸干皮、枝皮和根皮的揮發(fā)油成分中分別定性出90，82和76種化合物，三者共有組分50個；首次在該藥材的揮發(fā)油成分中同時定性、(半)定量分析了桉油

9、醇的三種同分異體(α-，β-和γ-)；比較分析表明，厚樸干皮、根皮和枝皮的揮發(fā)油成分存在一定的相似性和差異性。本部分內(nèi)容為厚樸藥材資源的合理使用及藥理藥效研究提供參考。
　　 第五部分為直觀推導式演進特征投影法(HELP)和交互移動窗口因子分析法(AMWFA)用于化濕藥揮發(fā)油成分的分析(第六章)。運用HELP法和AMWFA法，首次對五種常用化濕藥(砂仁、蒼術(shù)、藿香、佩蘭和厚樸)的揮發(fā)油成分的GC-MS數(shù)據(jù)進行比較分析，利用程序升