山梨醇轉(zhuǎn)運子和SDH基因cDNA的克隆及其序列分析.pdf

1、山梨醇是薔薇科植物主要的光合產(chǎn)物、運輸和貯藏物質(zhì)，起著其他植物中蔗糖的作用。山梨醇轉(zhuǎn)運子是薔薇科植物運輸山梨醇的重要酶。 本試驗首先以“皇家嘎拉”蘋果葉片為試材，根據(jù)報道的山梨醇轉(zhuǎn)運子的保守區(qū)設(shè)計引物，經(jīng)RT-PCR獲得一條長度為58lbp的片段，回收并進行測序。通過與GeneBank蛋白數(shù)據(jù)庫比對分析發(fā)現(xiàn)其蛋白序列與三種蘋果的序列MdSOT4、MdSOT6、MDSOT1同源性分別為95％、92％、92％；與酸櫻桃(Prunus

2、 Cerasus)、大豆(Glycine max)的同源性分別為78％、77％。應(yīng)用SMART軟件分析，該片斷編碼181個氨基酸，含有四個AgrB結(jié)構(gòu)域，為一種跨膜蛋白結(jié)構(gòu)。 其次，以“皇家嘎拉”蘋果葉片為試材，根據(jù)已知的多種植物的山梨醇脫氫酶序列，設(shè)計擴增蘋果保守區(qū)上下游引物SDH1和SDH2，PCR擴增獲得了SDH基因cDNA，經(jīng)克隆測序獲得4個cDNA序列，約600bp。同源性表明：該基因與蘋果中已克隆的SDH基因家族具有