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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:
運(yùn)動(dòng)功能障礙、吞咽困難、失語、視覺障礙等都是有幸存活下來的腦卒中患者較常見的后遺癥。近年來,為了更好的改善腦卒中患者殘余的功能障礙,許多新的康復(fù)方法已經(jīng)被應(yīng)用。康復(fù)治療的效果雖然已經(jīng)得到國(guó)際公認(rèn),但缺血性腦卒中存在非常復(fù)雜的病理生理機(jī)制,有多種病理環(huán)節(jié)參與,其中減輕急性期的神經(jīng)元凋亡與損傷是改善其預(yù)后及其疾病轉(zhuǎn)歸的關(guān)鍵,如何增強(qiáng)缺血性腦組織對(duì)損傷的耐受力是亟待解決的問題。有研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)生長(zhǎng)因子不足將嚴(yán)重限制腦卒中
2、患者3個(gè)月后的感覺、運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)。目前研究證實(shí),鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)可以顯著改善急性期神經(jīng)細(xì)胞的病理狀態(tài),促進(jìn)缺血組織神經(jīng)元的存活和生長(zhǎng)發(fā)育并可以防止其受損凋亡,刺激受損神經(jīng)元分化成熟及再生,并能夠選擇性的作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),顛覆了傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為的NGF僅作用于周圍神經(jīng)的看法。我們的前期臨床研究也證實(shí),NGF對(duì)康復(fù)治療的腦卒中的患者的日常生活活動(dòng)能力(activitiies of daily living,ADL)及運(yùn)動(dòng)功能有較好的
3、促進(jìn)效應(yīng),但具體機(jī)制尚不明確。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道尚少。有研究表明,康復(fù)訓(xùn)練能夠促使腦細(xì)胞分泌BDNF等多種營(yíng)養(yǎng)因子,但是對(duì)于康復(fù)訓(xùn)練聯(lián)合NGF對(duì)腦卒中患者的神經(jīng)功能恢復(fù)的生物學(xué)機(jī)制尚不清楚。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)也未見具體相關(guān)報(bào)道。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain derived neurophic factor,BDNF)作為神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族其中的一員,具有抵抗細(xì)胞凋亡、增加突觸的可塑性及促神經(jīng)元軸突生長(zhǎng),加速神經(jīng)康復(fù)的作用。腦損傷后各種功能障礙的重要
4、原因就是腦缺血后誘發(fā)的多種病理生理改變誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生凋亡。防止細(xì)胞凋亡是缺血性腦損傷疾病轉(zhuǎn)歸的關(guān)鍵,Bax是Bcl-2家族的一個(gè)凋亡前體成員,其水平的高低與神經(jīng)元的凋亡密切相關(guān),Bax能激活Caspase家族級(jí)聯(lián)反應(yīng)進(jìn)而誘導(dǎo)凋亡信號(hào)通路的啟動(dòng)。本課題通過改良線栓法制作大鼠右側(cè)中動(dòng)脈栓塞(MCAO)腦梗死模型,給予外源性NGF并采用神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry, IHC)及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
5、(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)方法觀察康復(fù)訓(xùn)練聯(lián)合NGF對(duì)腦梗死大鼠神經(jīng)行為學(xué)及腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF、促凋亡蛋白Bax表達(dá)的影響,探討分析其在缺血后腦損傷中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的生物學(xué)機(jī)制。
目的:
探討康復(fù)訓(xùn)練聯(lián)合NGF對(duì)腦梗死大鼠神經(jīng)行為學(xué)及海馬組織中BDNF和Bax表達(dá)的影響,研究二者在促進(jìn)大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)方面是否存
6、在協(xié)同效應(yīng)及其作用機(jī)制。
方法:
將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、NGF組、康復(fù)訓(xùn)練組及康復(fù)訓(xùn)練聯(lián)合NGF治療組;采用改良線栓法制作大鼠右側(cè)中動(dòng)脈栓塞(MCAO)腦梗死模型,NGF組制模成功后立即給予肌肉注射NGF20μg/(kg·d);康復(fù)訓(xùn)練組制模成功后72 h給予平衡木、轉(zhuǎn)棒、網(wǎng)屏、滾筒訓(xùn)練;聯(lián)合治療組同時(shí)給予NGF和康復(fù)訓(xùn)練治療。各組分別于術(shù)后7d、14d、21d采用國(guó)際上通用的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)Zea-longa5分制
7、進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分;采用免疫組化法檢測(cè)海馬組織BDNF及Bax蛋白的表達(dá),RT-PCR法檢測(cè)BDNF mRNA、Bax mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:
1.各組神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分的比較各個(gè)時(shí)間點(diǎn)康復(fù)訓(xùn)練組、NGF組及聯(lián)合治療組點(diǎn)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分明顯低于對(duì)照組(均P<0.05);且聯(lián)合治療組明顯低于康復(fù)訓(xùn)練組、NGF組(均P<0.05)。
2.免疫組化檢測(cè)BDNF、Bax的表達(dá):與對(duì)照組相比,康復(fù)訓(xùn)練組、NGF
8、組及聯(lián)合治療組各時(shí)間點(diǎn)海馬組織BDNF表達(dá)的光密度(optical density, OD)值明顯增加,Bax表達(dá)的OD值明顯降低(均P<0.05);與康復(fù)訓(xùn)練組、NGF組相比,聯(lián)合治療組海馬組織BDNF及Bax表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。
3.RT-PCR檢測(cè)各組腦組織BDNFmRNA和Bax mRNA表達(dá)的比較與對(duì)照組相比,康復(fù)訓(xùn)練組、NGF組及聯(lián)合治療組各時(shí)間點(diǎn)海馬組織BDNFmRNA累積光密度(Iteg
9、ral Optical Density,IOD)明顯增加,BaxmRNAIOD明顯降低(均P<0.05);與康復(fù)訓(xùn)練組、NGF組相比,聯(lián)合治療組海馬組織BDNF mRNA及Bax mRNA IOD表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。
結(jié)論:
1、康復(fù)訓(xùn)練聯(lián)合NGF可通過上調(diào)BDNF、下調(diào)Bax的表達(dá)而顯著促進(jìn)大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)。
2、康復(fù)訓(xùn)練與NGF二者在促進(jìn)神經(jīng)元存活及阻抑細(xì)胞凋亡方面存在協(xié)
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